固定化酶的制备和应用

固定化酶的制备和应用内容摘要：

( 1) 乳糖酶溶解时为了保持酶的活性，需使用磷酸缓冲液。 ( 2) 缓冲液反复冲洗一方面针对形成凝胶后表面还有一些酶没有包埋在凝胶内部的微孔中被冲洗掉，另一方面维持酶的活性。 ( 3) Ar c 和 B is 都是神经性毒剂，操作过程中注意不要沾到皮肤上和吸入体内，一旦沾到皮肤上要立即用水冲洗。 ( 4) 聚合反应和试剂的质量有很大的关系，如果在教材规定的时间内还没有聚合完成，可以适当延长聚合时间。 第 8课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 活学活用 1 ．下列关于固定化乳糖酶的制备的说法，不正确的是 ( ) A ．在乳糖酶的溶解中加入磷酸缓冲液是维持 pH 相对稳定，保证乳糖酶的活性 B ．聚合过程中应将混有各种物质的磷酸缓冲液迅速倒入乳糖酶的溶解液中，缓慢搅拌混匀 C ．聚合过程中各种物质就放在 40 ℃ 进行聚合反应30 m i n D ．漂洗过程中用磷酸缓冲液洗涤 4 ～ 6 次，将其表面没有固定的酶冲洗掉， 0 ～ 4 ℃ 保存备用 第 8课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 解析 对于固定化乳糖酶的制备过程中始终都应该是用缓冲液来维持 pH 的相对稳定，从而保证酶不会变性失活，而对于聚合反应完成后形成凝胶应该在温度为 4 ℃ ，而不是 40 ℃。 答案 C 第 8课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 探究点二 固定化酶的应用 固定化酶在工业生产和医学等方面有着重要的用途，下面我们就利用固定化酶来检测牛奶中乳糖的分解。 1 ． 实验原理 乳糖酶可以将牛奶中的乳糖分解为 ____________ _____ ，还原糖可和 ______ 试剂反应生成 ______ 色化合物，根据化合物颜色的深浅变化，可以了解乳糖酶的作用活性。 2 ． 方法步骤 ( 1) 鲜牛奶的处理：取新鲜牛奶 k g 放入 1 000 m L 干净烧杯中， _________ ℃ 巴氏灭菌。 将灭菌后的牛奶冷却至__________ ℃ ， ______ 后平均分为两部分，一部分放入A 烧杯，另一部分放到 B 烧杯内作对照。 过滤 半乳糖和葡萄糖 斐林 砖红 85～ 90 45～ 50 第 8课时 学习探究区 本课栏目开关 知识 储备区 学习 探究区 自我 检测区 ( 2) 加酶分解：向 A 烧杯内加入适量的 __________ _ 制剂，_________ ℃ 条件下保温 45 m i n ，保温过程中要用预先灭过菌的玻璃棒每隔一段时间轻轻搅拌。 ( 3) 检测乳糖的分解：保温到时后，将牛奶 ______。 用移液管分别取 A 烧杯和 B 烧杯内的牛奶滤液各 2 m L ，放到两支试管中，用移液管取 ______ 试剂各 2 m L 分别放入被检试管中，然后把试管放入装有 _______ 的烧杯中，摇动试管，观察试管中溶液颜色的变化。 ( 4) 固定化酶的回收：实验完成后，用 ________ 反复洗涤固定化酶，再用体积分数为 % 的 ________ 洗涤，然后于 ________ ℃ 下保存。 0～ 4 固。