高二生物dna重组技术的基本工具

高二生物dna重组技术的基本工具内容摘要：

筛选。 已知限制酶 Ⅰ 的识别序列和切点是－G↓ GATCC－ ， 限制酶 Ⅱ 的识别序列和切点是－↓ GATC－。 根据图示判断下列操作正确的是 ( ) 例 1 A． 目的基因和质粒均用限制酶 Ⅱ 切割 B． 目的基因和质粒均用限制酶 Ⅰ 切割 C． 质粒用限制酶 Ⅱ 切割 ， 目的基因用限制酶 Ⅰ切割 D． 质粒用限制酶 Ⅰ 切割 ， 目的基因用限制酶 Ⅱ切割 【 尝试解答 】 D 【 解析 】 首先把目的基因切下来要用到限制酶Ⅱ ；如果再用限制酶 Ⅱ 切割质粒 ， 则 2个标记基因都被切开 ， 标记基因将失去作用。 而用限制酶 Ⅰ 切割质粒可保留一个标记基因 ， 而产生的黏性末端和限制酶 Ⅱ 切割下来的目的基因可以互补配对。 【 互动探究 】 上题中限制酶 Ⅰ 切开化学键后产生哪种类型的末端。 【 提示 】 黏性末端。 【 易误警示 】 (1)限制性核酸内切酶是一类酶而不是一种酶。 (2)限制性核酸内切酶作用的化学键为磷酸二酯键 ，而不是氢键。 (3)不同种类的限制性核酸内切酶识别与切割的位点不同 ， 这与酶的专一性是一致的。 与 DNA有关的各种酶比较 名称 作用 参与生理过程应用 作用位点 (如图 ) DNA连接酶 连接两个 DNA片段 基因工程 a 限制性内切酶 切割某种特定的脱氧核苷酸序列 a DNA聚合酶 在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸 DNA复制 a 名称 作用 参与生理过 程应用 作用位点 (如图 ) RNA聚合酶 在核苷酸链上添加单个核苷酸 转录 a 解旋酶 使碱基间氢键断裂形成单脱氧核苷酸链 DNA复制及转录 b 逆转 录 酶 以 RNA为模板合成 DNA 逆转录、基因工程 特别提醒 ① DNA连接酶和 DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键 ， 而不是氢键 ， 氢键是分子间的静电吸引力 ， 不需通过酶催化形成。 ② DNA连接酶只能在两个 DNA。