高二生物dna和蛋白质技术内容摘要:

的多种杂质。 5. 最后析出 DNA必须使用冷酒精 (至少在 5℃ 以下存放 24小时 ),并且将 1份含 DNA的 NaCl溶液加入到 2份的冷酒精中。 如果悬浮在溶液中的 DNA丝状物较少,可将混合液放入到冰箱中再冷却几分钟。 1. (改编 )在 DNA分子的粗提取实验中,两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是 ( ) A. 稀释血液、冲洗样品 B. 使血细胞破裂、降低 NaCl浓度使 DNA析出 C. 使血细胞破裂、增大 DNA溶解量 D. 使血细胞破裂、提取含杂质较少的 DNA 【 解析 】 在该实验过程中,第一次加入蒸馏水的目的是使血细胞吸水而破裂,以使核物质溶解。 第二次加入蒸馏水是为了降低 NaCl溶液的浓度至 mol/L,因为此时的 DNA溶解度最小,可使 DNA析出。 【 答案 】 B PCR扩增技术 一、 PCR相关技术原理与条件 1. PCR:多聚酶链式反应的简称,是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。 2. 引物:是一小段 RNA单链或单链 DNA,它能与 DNA母链的一段碱基序列互补配对。 3. 扩增方向: DNA的合成方向总是从子链的 5′端向 3′端延伸。 4. 解旋:利用了 DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 5. 酶:耐高温的 Taq- DNA聚合酶,高温不会失活。 6. PCR的条件:一定的缓冲溶液下才能进行,需提供 DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的 DNA聚合酶,同时要控制温度。 二、过程 1. 变性:当温度上升到 90 ℃ 以上时,双链 DNA解旋为单链,如下图: 2. 复性:温度下降到 50℃ 左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链 DNA结合,如下图: 3. 延伸:温度上升到 72℃ 左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在 DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的 DNA链,如下图: 三、结果 1. PCR一般要经历三十多次循环,每次循环都包括变性、复性、延伸三步。 3. 两引物之间的固定长度的 DNA序列呈指数扩增。 (1)DNA聚合酶的特性,只从 DNA的 3′ 端开始延伸 DNA链,而不能从头合成,故 DNA复制需引物。 (2)子链的延伸从引物 3′ 端开始,所以 DNA的合成方向是子链的 5′ 端 ―→3′ 端。 【 例 2】 关于 DNA的复制,下列叙述正确的是 ( ) A. DNA 聚合酶不能从头开始合成 DNA,只能从引物的 5′端延伸 DNA 链 B. DNA 复制不需要引物。
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