高三生物dna重组技术的基本工具内容摘要:

二酯键 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A DNA连接酶与 DNA聚合酶是一回事吗。 为什么。 答:不是一回事。 基因工程中所用的连接酶有两种:一种是从大肠杆菌中分离得到的,称之为Ecoli连接酶。 另一种是从 T4噬菌体中分离得到,称为 T4连接酶。 这两种连接酶催化反应基本相同,都是连接双链 DNA的缺口( nick),而不能连接单链 DNA。 DNA连接酶和 DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键(在相邻核苷酸的 3位碳原子上的羟基与5位碳原子上所连磷酸基团的羟基之间形成),那么,二者的差别主要表现在什么地方呢。  ( 1) DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的末端上,形成磷酸二酯键;而 DNA连接酶是在两个 DNA片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与 DNA片段之间形成磷酸二酯键。  ( 2) DNA聚合酶是以一条 DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的 DNA链;而 DNA连接酶是将 DNA双链上的两个缺口同时连接起来。 因此 DNA连接酶不需要模板。  此外,二者虽然都是由蛋白质构成的酶,但组成和性质各不相同。 三、 “分子运输车” —基因进入受体细胞的载体: 练习答案  2和 7能连接形成 …ACGT… …TGCA… ;  4和 8能连接形成 …GAATTC… …CTTAAG… ;  3和 6能连接形成 …GCGC… …CGCG… ;  1和 5能连接形成 …CTGCAG…。
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