生物化学与分子生物学技术实践

生物化学与分子生物学技术实践内容摘要：

， C 项正确； 当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢，后洗脱出来， D 项错误。 答案 D 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 2 . ( 2 0 1 1 海南卷， 30) 许多植物含有 天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。 现用薄荷叶提取薄荷油。 回答问题： ( 1 ) 薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用 ( 鲜、干 ) 薄荷叶作原料，其原因是。 ( 2 ) 用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂 是 ，原理是。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 ( 3 ) 用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是。 常用于分离油层和水层的器皿是。 分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是 ，除去固体硫酸钠的常用方法是。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 解析 ( 1 ) 薄荷油挥发性强，薄荷叶在干燥过程中，薄荷油因挥发含量降低。 ( 2 ) 因薄荷油易溶于石油醚、酒精等有机溶剂，故用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂为有机溶剂。 (3) 向通过水蒸气蒸馏得到的油水混合物中加入 NaCl 后，增加水的密度，就会出现油水分层现象。 常用分液漏斗将水、油分离。 向分离出的油层中加无水 Na 2 SO 4 的作用是除去少量的水，用过滤的方法除去薄荷油中的 Na 2 SO 4。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 答案 ( 1 ) 鲜 鲜叶比干叶的薄荷油含量高 ( 2 ) 有机溶剂 薄荷油易溶于有机溶剂，而不溶于水 (3) 增加水层的密度，有利于油层和水层的分离 分液漏斗 除去少量的水 过滤 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 3. ( 2020 山东卷， 34) 胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下： ( 1) 筛选产胡萝卜素的酵母菌 R 时，可选用 或平板划线法接种。 采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 ( 2 ) 培养酵母菌 R 时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌 R 的生长提供 和。 ( 3 ) 从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和 以防止胡萝卜素的分解；萃取过程中宜采用 方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是。 ( 4 ) 纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。 鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 解析 ( 1 ) 接种微生物的方法主要是涂抹平板法和平板划线法，接种过程为了避免其他杂菌的污染，要做无菌操作，所以接种前需对接种环进行灭菌。 ( 2 ) 蔗糖主要提供碳源，当然也可以作为能源物质，硝酸盐含氮元素，可提供氮源。 3 温度过高、干燥时间过长会导致胡萝卜素分解；由于萃取剂往往有挥发性，直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸；萃取后需将原料中不溶于萃取剂的成分滤去。 ( 4 ) 提取出来的胡萝卜素往往不是纯的，用胡萝卜素标 准品主要起一个对照的作用。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 答案 ( 1 ) 涂抹平板法 杀灭接种 环上的微生物 ( 2 ) 碳源 氮源 ( 3 ) 干燥时间 水浴加热 滤去萃取后的不溶物 ( 4 ) ( 实验 ) 对照 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 4 . 血清蛋白电泳时通常用 pH 为 8 . 6 的缓冲液，此时各种蛋白质带有的电荷为 ( ) A . 清蛋白带正电荷，其他球蛋白带负电荷 B . 清蛋白带负电荷，其他球蛋白带正电荷 C . 清蛋白与其他球蛋白均带负电荷 D . 清蛋白与其他球蛋白均带正电荷 模 拟 题 组 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 解析 pH 为 的缓冲液既能维持血清蛋白的生物活性，又能使血清中各种蛋白质带同一种电荷 — 负电荷，这样在负极端点样，它们都向正极 移动，根据移动速度不同达到分离目的。 答案 C 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 5. 在遗传病及刑侦破案中常需要对样品 DNA 进行分析， P CR 技术能快速扩增 DNA 片段，在几个小时内复制出上百万份的 DNA 拷贝，有效地解决了因为样品中 DNA 含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。 据图回答相关问题： a 链 5 ′ － G － G „„ T － C － 3 ′ 5 ′ － G － G － OH( 引物 Ⅰ ) b 链 3 ′ － C － C „„ A － G － 5 ′ ( 引物 Ⅱ ) 94 ℃↓ 5 ′ － G － G „„ T － C － 3 ′ 3 ′ － C － C „„ A － G － 5 ′ 40 ～ 60 ℃↓ 5 ′ － G － G － OH 5 ′ － G － G „„ T － C － 3 ′ 3 ′ － C － C „„ A － G － 5 ′ 72 ℃↓ 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 ( 1) 在相应的横线上写出引物 Ⅱ ，并在复性这一步骤中将引物 Ⅱ置于合适的位置。 ( 2) 在相应的横线上写出循环一次后生成的 DNA 分子。 ( 3) 若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P 标记，请分析循环一次后生成的 DNA 分子的特点是 _______________ ___________ _____________________ ；循环 n 次后生成的 DN A 分子中不含放射性的单链占总单链的比例为 ________。 ( 4) P CR 反应过程的前提条件是 ____________ ， P CR 技术利用DNA 的 ________________ 原理解决了这个问题。 ( 5) 在对样品 DNA 进行分析的过程中发现， DNA 掺杂着一些组蛋白，要去除这些组蛋白可加入的物质是 ______ ____。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 ( 1) 在相应的横线上写出引物 Ⅱ ，并在复性这一步骤中将引物 Ⅱ置于合适的位置。 ( 2) 在相应的横线上写出循环一次后生成的 DNA 分子。 ( 3) 若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P 标记，请分析循环一次后生成的 DNA 分子的特点是 _______________ ___________ _____________________ ；循环 n 次后生成的 DN A 分子中不含放射性的单链占总单链的比例为 ________。 ( 4) P CR 反应过程的前提条件是 ____________ ， P CR 技术利用DNA 的 ________________ 原理解决了这个问题。 ( 5) 在对样品 DNA 进行分析的过程中发现， DNA 掺杂着一些组蛋白，要去除这些组蛋白可加入的物质是 ______ ____。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 解析 (1 )D N A 聚合酶不能从头开始合成 DNA ，只能从 3 ′ 端延伸D N A 链，所以引物就提供了 3 ′ 端，子链延伸方向 5 ′ → 3 ′ ，引物 Ⅰ 与 b 链部分碱基互补，引物 Ⅱ 则与 a 链部分碱基互补，且连接到 a 链的 3 ′ 端，故引物 Ⅱ 的结构为 5 ′ — G — A — OH ，复性结果为： HO — A — G — 5 ′ 5 ′ — G — G „„ T — C — 3 ′ (2 ) 经过一次循环后，产生的两个 DNA 分子分别含有引物 Ⅰ 和引物 Ⅱ。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4 5 解析 ( 3 ) 由于作为原料的四种脱氧核苷酸被32P 标记，所以新合成的子链均含有放射性，一次循环后的两个 DNA 各有一条链含32P ，若复制 n 次，产生子链共 2n 2 ，其中只有亲本的两条母链不含32P ，则其所占比例为 2 /( 2 n 2 ) ＝ 1/ 2n。 ( 4) D N A 复制是以两条母链为模板，按照碱基互补配对原则进行的。 因此，首先要解旋，使两条母链碱基暴露出来，才能按照碱基互补配对的原则把相应的核苷酸一个个地连接起来。 D N A 分子在 80 ～ 100 ℃ 的温度范围内变性，双链解开成单链，当温度慢慢降低时，双能重新结合形成双链。 ( 5 ) 本题考查了 DNA 中杂质蛋白质的去除，利用酶的专一性，应加入蛋白酶。 高考模拟 提能训练 返回 高考模拟 1 2 3 4。