高三生物实验总结内容摘要:
6 (七)探究影响酶活性的因素的实验 实验目的: 1.探究不同温度和 PH 对过氧化氢酶活性的影响。 2.培养实验设计能力。 方法步骤: 提出问题→作出假设→设计实验→(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)→实施实验→分析与结论→表达与交流。 实例 1:比较过氧化氢酶和 Fe 3+的催化效率 实验原理: 鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和 Fe3+都能催化 H2O2分解放出 O2。 经计算,质量分数为 %的 FeCl3溶液和质量分数为 20%的肝脏研磨液相比,每滴 FeCl3溶液中的 Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的 25 万倍 方法步骤: 步骤 注意问题 解释 取 4 支洁净试管,编号,分别加入 2mL H2O2溶液 不让 H2O2接触皮肤 H2O2有一定的腐蚀性 将 2 号试管放在 90oC 左右的水浴中加热,观察气泡冒出情况,与 1 号对照 向 3 号、 4 号试管内分别滴入 2 滴 FeCl3溶液和 2 滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况 不可用同一支滴管 肝脏研磨液必须是新鲜的 肝脏 要 制成 研磨液 由于酶具有高效性,若滴入的 FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性 因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低 研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积 23min 后,将点燃的卫生香分别放入 3 号和 4 号试管内液面的上方,观察复燃情况 放卫生香时,动作要快,不要插到气泡中 现象: 4 号试管产生气泡多,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃, 3 号试管产生气泡少,冒泡时间长,卫生香几乎无变化 避免卫生香因潮湿而熄灭 实例 2:温度对酶活性的影响 实验原理: 1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。 2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。 )麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。 注:市售 a淀粉酶的最适温度约 60oC 方法步骤 : 操作 注意问题 解释 取 3 支试管,编上号,然后分别注入2mL 可溶性淀粉溶液 另取 3 支试管,编上号,然后分别注入1mL 新鲜淀粉酶溶液 将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成 3组,分别放入热水(约 60oC)、沸水和冰块中 ,维持各自的温度 5min 不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液 防止混合时,由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化,反应温度不是操作者所要控制的温度,影响实验结果。 分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度 5min 保持各自温度时间不能太短 淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间 在 3 支试管中各滴入 12 滴碘液,摇匀后观察这 3 支试管中溶液颜色变化并记录 碘液不能滴加太多 防止影响实验现象的观察 用表格的形式显示实验步骤 号 加入试剂或处理方法 试管 A B C a b c 1 可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL / / / 新鲜淀粉酶溶液 / / / 1mL 1mL 1mL 2 保温 5min 60oC 100oC 0oC 60oC 100oC 0oC 3 将 a 液加入到 A 试管, b 液加入到 B试管, c 液加入到 C 试管中,摇匀 4 保温 5min 60oC 100oC 0oC 5 滴入碘液,摇匀 2 滴 2 滴 2 滴 6 观察现象并记录 7 实例 3:PH 对酶活性的影响 用表格开式显示实验步骤:(注意操作顺序不能错) 序号 加入试剂或处理方 法 试管 1 2 3 1 注入新鲜的淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL 2 注入蒸馏水 1mL / / 3 注入氢氧化钠溶液 / 1mL / 4 注入盐酸 / / 1mL 5 注入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL 6 60oC水浴保温 5min 7 加入斐林试剂,边加边振荡 2mL 2mL 2mL 8 水浴加热煮沸 1min 9 观察 3支试管中溶液颜色变化变记录 (八) 叶绿体色素的提取和分离 实验目的: 1.尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法 分离提取到的色素。 2.分析实验结果,探究叶绿体中有几种色素,以及各自所呈现的颜色。 实验原理: 1.叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于丙酮等有机溶剂中,所以用丙酮、乙醇等能提取色素。 2. 层析液是一种脂溶性很强的有机溶 剂。 叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,分子量小的溶解度高,随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。 所以用层析法来分离四种色素。 实 验材料: 幼 嫩、鲜绿的菠菜叶 实验步骤: 步 骤 注 意 问 题 分 析 1.提取色素 5克绿叶剪碎,放入研钵,加SiO CaCO3和 5mL 丙酮(或 10mL无水乙醇)迅速、充分研磨。 (若没有无水乙醇,也可用体积分数为 95%的乙醇,但要加入适量的无水碳酸钠,除去水分) 加 SiO2 加 CaCO3 加丙酮 迅速 加 SiO2为了研磨得更充分。 加 CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。 因为叶绿素含镁,可被细胞液中的有机酸产生的氢代替,形成去镁叶绿素, CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸,防止叶绿体被破坏。 叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。 减少研磨过程叶绿素的分解,减少有毒性的丙酮挥发。 2.收集滤液漏斗基部放一单层尼龙布,研磨倒入漏斗内挤压,将滤液收集到小试管中,用棉花塞塞住试 尼龙布起过滤作用。 试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。 管口。 3.制备滤纸条 将干燥的滤纸,顺着纸纹剪成长 10cm,宽 1cm的纸条,一端剪去二个角,并在距这一端 1cm处划一铅笔线。 干燥 顺着纸纹剪成长条 一端剪去二个角 可吸收更多的滤液。 层析时,色素分离效果好。 可使层析液同时到达滤液细线。 4.划滤液细线 用毛细吸管 吸取少量滤液,沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线,干后重复三次。 滤液细线越细、越齐越好。 重复三次。 防止色素带之间部分重叠。 增加色素在滤纸上的附着量,实验结果更明显。 5.纸层析法分离色素 将 3mL层析液倒入烧杯中,将滤纸条(划线一端朝下)插入层析液中,用培养皿盖盖上烧杯。 层析液不能没及滤纸条。 烧杯要盖培养皿盖。 防止色素溶解在层析液中, 层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发 扩散最快是胡萝卜 素,扩散最慢是叶绿素 b,含量最多的是叶绿素 a。 四种色素之所以能被分离,是因为四种 色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。 结果滤纸条上从上到下依次为 :橙黄色 (胡萝卜素 )、黄色 (叶黄素 )、蓝绿色 (叶绿素 a)、黄绿色 (叶绿素 b). 实验讨论: 1.滤纸条上的滤液细线,为什么不能触及层析液。 答:滤纸条上的滤 液细线如触及层析液,滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中,实验 会失败。 2.提取和分离叶绿体色素的关键是什么。 答:提取叶绿体色素的关键是:①叶片要新鲜、浓绿;②研磨要迅速、充分;③滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。 分离叶绿体色素的关键是:一是滤液细线要细且直,而且 要重复划几次;二是层析液不能没及滤液线。 (九 ) 探究酵母菌的呼吸方式 1 原理 : 酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸 ,产生二氧化碳和水: C6H12O6 + 6O2 + 6H2O 酶 6CO2 + 12H2O + 能量 8 在无氧条件下进行无氧呼吸 ,产生酒精和少量二氧化碳: C6H12O6 酶 2C2H5OH + 2CO2 + 少量能量 2 装置:下图为 “探究酵母菌细胞呼吸的方式 ”的实验装置图,请据图分析 甲:有氧呼吸装置 乙:无氧呼吸装置 .A 瓶加入的试剂是 NaOH,其目的是: 使进入 B 瓶的空气先经过 NaOH 处理,排除空气中CO2 对实验结果的干扰。 C 瓶和 E 瓶加入的试剂是澄清石灰水 (或溴麝香草酚蓝水溶液 ),其作用是 : 检测 CO2的产生 D 瓶应封口放置一段时间后,再连通 E 瓶,其原因是: D 瓶应封口放置一段时间后,酵母菌会将瓶中的氧气消 耗完。 再连通 E 瓶,就可以确保通入澄清石灰水 (或溴麝香草酚蓝水溶液 )的 CO2是酵母菌的无氧呼吸所产生的 检测: (1)检测 CO2 的产生:使澄清石灰水变浑浊,或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。 (2)检测酒精的产生:橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与酒精发生反应,变成灰绿色。 (十)观察植物细胞的有丝分裂 实验原理 : 有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式。 在植物体中,有丝分裂常见于分生区的细胞,如:根尖、茎尖等。 高等植物细胞有丝分裂的过程,分为分裂间期和细胞分裂期,由于在细胞分裂期,细胞 中发生着染色体的有规律的变化,又将其分为前期、中期、后期、末期。 可以用高倍镜观察植物细胞有丝分裂的过程,根据各个时期细胞内染色体(或染色质)的变化情况,识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。 细。高三生物实验总结
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