20xx人教版高中生物选修一5-2多聚酶链式反应扩增dna片段ppt同步课件内容摘要:

0~ 96 ℃ )以上时 , 双链 DNA解聚为单链 , 称之为变性;当温度下降到 50 ℃ (40~ 60 ℃ )左右时 ,两种引物通过碱基互补配对与两条单链 DNA结合;当温度上升到 72 ℃ (70~ 75 ℃ )时 , 溶液中的四种脱氧核苷酸在 Taq DNA聚合酶的作用下 , 根据碱基互补配对原则合成新的 DNA链 , 称为延伸。 答案 A 1. 实验用具 (1)PCR仪 :该仪器能自动调控 , 实现 DNA的扩增。 如果没有 PCR仪 , 可用 3个 代替 , 操作时按程序在 3个 中 PCR反应的微量离心管。 (2)微量离心管:总容积为 , 实际上是进行 的场所。 (3)微量移液器:用于。 PCR技术的实验操作及评价 温度 恒温水浴锅 水浴锅 来回转移 多聚酶链式反应 转移 PCR配方中的液体 2. 操作步骤 准 备 → →混合 → →反应。 3. 操作提示 (1)为 避免 等因素的污染 , 实验中使用的一些用具在使用前必须进行。 (2)所用的 和 应分装成小份 , 并在 储存。 (3)在 中添加反应成分时 , 每吸取一种试剂后 ,移液器上的枪头必须。 加入组分 设置 PCR的循环程序 外源 DNA 高压灭菌 缓冲液 酶 - 20℃ 微量离心管 更换 [思维激活 2] PCR操 作中模板 DNA是否需解旋。 需要旋转酶吗。 提示 PCR操作中 , 模板 DNA仍需解旋 , 但该解旋过程不是 DNA解旋酶催化的结果 , 而是利用 DNA热变性的原理 , 在 80~ 100 ℃温度范围内 , DNA双螺旋结构将解体 , 双链分开 , 以此达到解旋的目的。 1. PCR仪: PCR自动化程度较高,参照下表设计程序即可。 循环数 变 性 复 性 延伸 第 1次 94 ℃ , 10 min - - 30次 94 ℃ , 30 s 55 ℃ , 30 s 72 ℃ , 1 min 最后一次 94 ℃ , 1 min 55 ℃ , 30 s 72 ℃ , 1 min CR 体外扩增 DNA 片段实验流程 准备 ↓  按照 P。
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