20xx人教版高中生物选修一2-2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数ppt同步课件

20xx人教版高中生物选修一2-2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数ppt同步课件内容摘要：

之间 ， 便于计数。 (3)微生物的培养与观察 将培养基平板放置于 温室中培养 1～ 2d， 每隔 统计一次 数目 ， 最后选取数目 时的记录作为结果。 (4)细菌的计数 当菌落数目稳定时 ， 取同一条件下的至少 个平板进行计数 ， 求出 ， 并根据所对应的 计算出样品中细菌的数目。 稀释程度 菌落数目 30～ 300 30～ 37 ℃ 24h 菌落 稳定 3 平均值 稀释度 2． 操作提示 (1)无 菌操作 ① 取土样的用具在使用前都需要。 ② 应在 旁称取土壤。 并在 附近将土样倒入锥形瓶中 ，塞好棉塞。 ③ 在稀释土壤溶液的过程中 ， 每一步都要在 旁操作。 (2)做好标记 本实验使用的平板和试管比较多 ， 为避免混淆 ， 最好在使用前就。 灭菌 火焰 火焰 火焰 做好标记 3． 课题延伸 细 菌合成的 将尿素分解成 ， 使培养基的 增强。 在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂培养细菌 ， 若指示剂变 ， 可确定该种细菌能够。 脲酶 氨 碱性 尿素 酚红 红 分解尿素 [思维激活 2] 分离尿素细菌的培养基为何能起到选择作用。 提示 微生物的生长需要氮源 ， 大多数微生物不能直接利用尿素作氮源 ， 但尿素细菌却可以尿素作氮源 ， 因此 ， 在以尿素为唯一氮源的培养基中 ， 唯有能利用尿素的微生物方可生长繁殖 ， 其他微生物则不能生长繁殖而被淘汰 ， 因而该培养基可起到筛选尿素细菌的作用。 1． 土壤中分解尿素的细菌的分离 (1)分 离的原理 ① 土壤中的细菌之所以能够分解尿素 ， 是因为它们体内能合成脲酶。 这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。 ② 实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件 (包括营养 、 温度 、 pH等 )， 同时抑制或阻止其他微生物生长。 ③ 分离分解尿素的细菌的培养基中的氮源只有尿素 ， 理论上只有能合成脲酶的微生物才能在上面生长。 (2)尿素细菌分离与计数的实验流程： 土壤取样 → 样品稀释 → 取样涂布 → 微生物培养 → 观察并记录结果→ 细菌计数 2． 统计菌落数目的方法 (1)显 微镜直接计数法 ① 原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板 ， 在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。 ② 方法：用计数板计数。 ③ 缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法 (活菌计数法 ) ① 原理：当样品的稀释度足够高时 ， 培养基表面生长的一个菌落 ，来源于样品稀释液中的一个活菌 ， 通过统计平板上的菌落数 ， 就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ② 操作 a． 设置重复组：同一稀释度下 ， 至少涂布 3个平板作为重复组 ，才能增强实验的说服力与准确性。 分析结果时 ， 需考虑重复组的结果是否一致 ， 结果明显不一致 ， 意味着操作有误 ， 需要重新实验。 b． 为了保证结果准确 ， 一般选择菌落数在 30～ 300的平板进行计数。 ③ 计算公式：每克样品中的菌株数＝ C/V M， 其中 C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 ， V代表涂布平板时所用的稀释液的体积 /mL， M代表稀释倍数。