高中生物同步课件：53血红蛋白的提取和分离7人教版选修1

高中生物同步课件：53血红蛋白的提取和分离7人教版选修1内容摘要：

多） 血红蛋白 （ 90％） 两个 α －肽链 两个 β 一肽链 四个亚铁血红素基团 ： 血液有哪些成分。 ： 用鸡的红细胞提取 DNA，用猪、牛、羊的红细胞提取血红蛋白的原因是什么。 鸡的红细胞具有细胞核，含有 DNA，便于进行 DNA的提取；人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白。 血红蛋白 两个 α －肽链 两个 β 一肽链 四个亚铁 血 红素基团 每个肽链环绕一个 亚铁血红素基团， 此基团可携带 一分子 O2或一分子 CO2，血红蛋白因含有 血红素 而 呈 红色。 血红蛋白的特点： (1)红细胞的洗涤 : 去除杂质蛋白，利于后续血红蛋白的分离纯化 . 采集血样 低速短时间离心 （速度越高和时间越长，会使白细 胞等一同沉淀，达不到分离的效果） 吸取血浆： 上层透明的黄色血浆。 盐水洗涤： 下层暗红色的红细胞 +五倍体积的 ％ 的 NaCl溶液洗涤，搅拌 10min 低速 短时间 离心： 重复 5步骤三次 上清液中已没有黄色：红细胞洗涤干净。 ① 目的 : ② 操作： 洗涤次数过少 ,无法除去血浆蛋白。 (2)血红蛋白的释放： 加蒸馏水到 原血液体积 ， 加 40％体积的甲苯 （溶解细胞膜） 置于 磁力搅拌器 搅拌 10min（加速细胞破裂） 红细胞破裂，释放出血红蛋白 (3)分离血红蛋白溶液： ① 过程 ： 将搅拌好混合液转移到离心管内，以 2020r/min的速度 离心 10 min。 ② 试管中溶液层次： 第 1层（最上层）： 甲苯层 （无色透明）； 第 2层（中上层）： 脂溶性物质沉淀层 （白色薄层固体）； 第 3层（中下层）： 血红蛋白的水溶液层 （红色透明液体）； 第 4层（最下层）： 杂质沉淀层 （暗红色）。 ③ 分离 ： 滤纸过滤：除去脂溶性沉淀层， 分液漏斗中静置：分出下层的 红色透明液体。 甲苯层 （ 无色透明） 白色薄层固体 红色透明液体 杂质沉淀层 （ 暗红色 ） 试管中溶液层次 (4)透 析： ① 过程： 取 1ml的血红蛋白溶液 装入透析袋中，将透析袋放入盛有300ml的 20mmol/l的磷酸缓冲液 中（ pH为 ），透析 12h ② 目的： 除去样品中分子量较小的杂质和离子。 或用于更换样品的缓冲液。 20mmol/L磷酸缓冲液 1mL 透析过程动画演示 : （ 1）凝胶色谱。