高中生物专题5课题3血红蛋白的提取和分离课件新人教版选修1内容摘要:

答案: B 二、血红蛋白的提取和分离的实验操作 1. 样品处理 (1)红细胞的洗涤:洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白。 采用低速短时间离心 , 吸出上层透明的黄色血浆 , 再加入五倍体积的生理盐水 , 重复洗涤三次 , 直至上清液中没有黄色 , 表明红细胞已洗涤干净。 洗涤次数过少 , 无法去除血浆蛋白;离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀 , 达不到分离的效果。 (2)血红蛋白的释放:红细胞在蒸馏水和甲苯的作用下破裂 , 释放出血红蛋白。 (3)分离血红蛋白溶液:将混合液进行离心后 , 会明显看到试管中的溶液的分层情况:第 3层的红色透明液体是血红蛋白的水溶液。 (4)透析:目的是除去样品中的相对分子质量较小的杂质。 2. 凝胶色谱操作 (1)凝胶色谱柱的装填: ① 装填前 , 凝胶用蒸馏水或者洗脱液充分溶胀。 ② 凝胶装填要均匀 , 色谱柱内不能有气泡 , 一旦发现存在气泡 , 必须重装。 ③ 装填完后 , 立即用 300 mL 20 mmol/L磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝。
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