沪科版生物第二册第三节基因工程与转基因生物之二

沪科版生物第二册第三节基因工程与转基因生物之二内容摘要：

限制酶切割质粒 ，使其出现一个切口 ，露出 黏性末端。 2）用 同一种 限制酶 切断目的基因 ，使其产生 相同 的 黏性末端。 3）将切下的目的基因片段 插入质粒 的切口处，再加入适量 DNA连接酶 ，形成了一个 重组 DNA分子 （重组质粒） 目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的 基因重组的过程。 用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连接酶的作用下连接形成重组 DNA分子。 目的基因与运载体结合 • 常用的受体细胞： 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 • 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴 细菌或病毒侵染细胞 的途径。 • 步骤三：目的基因导入受体细胞 第三步：将目的基因导入受体细胞 导入 扩增 常用的受体细胞：菌类和动植物细胞 可以分泌人胰岛素 的细菌 导入过程：运载体为质粒，受体细胞为细菌 受体细胞：细菌 细胞壁的通透性增大 重组质粒进入受体细胞 目的基因随受体细胞的繁殖而复制 氯化钙 大量的目的基因 • 步骤四：目的基因的检测和表达 四环素 抗性基因 青霉素抗性基因 检测：通过检测 标记基因 的有无，来判断 目的基因是否导入 检测方法：将受体细胞放在含有青霉素或四环素的培养皿中培养，若存活，则导入成功；若死亡，则重组质粒没有导入受体细胞． 不能，受体细胞 必须表现出特定的性状 ，才能说明目的基因完成了 表达。 • 受体细胞摄入 DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗。 表达 ：通过特定性状的产生与否来确定目的基因是否表达 若不能表达，要对抗虫基因再进行 修饰。 怎样检验抗虫基因在棉细胞内是否表达呢。 没有抗虫基因 的棉植株 有抗虫基因的棉植株 棉铃虫 虫没有死 虫被杀死 没有表达 目的基因表达 1） 以下说法正确的是 （ ） A、 所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、 质粒是基因工程中唯一的运载体 C、 运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点 ， 以便与外源基因连接 D、 基因控制的性状都能在后代表现出来 C 练习 2） 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、 能复制。