新人教版生物选修312基因工程的基本操作程序

新人教版生物选修312基因工程的基本操作程序内容摘要：

酶： 既用到限制酶切割载体，又用到 DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键 ③ 启动子、终止子 对于目的基因表达必不可少 ④ 目的基因不能单独进入受体细胞， 必需以表达载体的方式携带进去。 注意 三、将目的基因导入受体细胞 （一）转化： （二）方法 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 —— 显微注射法 —— 感受态细胞 目的基因进入 _________内，并且在 受体细胞内维持 _____和 _____的过程 受体细胞 稳定 表达 将目的基因导入植物细胞的方法： （ 1） 农杆菌转化法 ① 农杆菌特点： 易感染双子叶植物和裸子植物，对大多数单子叶植物没有感染能力 ② 原理： Ti质粒上的 TDNA可以转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的 DNA上。 ③ 过程： ④ 优点 （ 2） 基因枪法 （ 3） 花粉管通道法 将目的基因导入动物细胞 ① 方法：显微注射法 ② 程序： 目的基因表达载体提纯 取卵（受精卵） 显微注射 受精卵 新性状动物 将目的基因导入微生物细胞 ① 原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ② 方法： 用 Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收 DNA分子 四、目的基因的检测与鉴定 —— 检查是否成功 （一）、检测 检测转基因生物染色体的 DNA上是否插入了目的基因 (关键步骤 ) ① .首先取出转基因生物的基因组 DNA ② .用含目的基因的 DNA片段用放射性同位素等作标记 ,以此做探针 ③ .使探针和转基因生物的基因组杂交 ,若显示出杂交带 ,表明染色体已插入染色体 DNA中 （ 1） 方法 : DNA分子杂交 （ 2）过程 : 归纳步骤 DNA分子杂交示意图 采用一定的技术手段，将两种生物的 DNA分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。 P15思考与探究 （二）、鉴定（个体生物学水平） 检测目的基因是否转录出了 mRNA 检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 ① 方法 : 分 子 杂 交 方法 : 抗原抗体杂交 ② 过程 : 用上述探针和转基因生物的 mRNA杂交 ,若出现杂交带 ,表明目的基因转录出了 mRNA 归纳步骤 (四 )目的基因的检测与鉴定 —— 检查是否成功 检测 —。