20xx人教版高中生物选修3专题1第1节dna重组技术的基本工具

20xx人教版高中生物选修3专题1第1节dna重组技术的基本工具内容摘要：

或平末端。 (5)实质：使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 知识贴士： ① 若限制酶切割后形成的是黏性末端 ， 则形成的两个黏性末端是反向重复序列。 ② 大多数限制酶的识别序列为 6个核苷酸组成 ， 例如EcoRI、 SmaI限制酶识别序列由 6个核苷酸组成 ， 也有少数限制酶的识别序列由 5或 8个核苷酸组成。 2． DNA连接酶 (1 ) 分类 E coli DNA 连接酶 来源：大肠杆菌作用：使黏性末端之 间连接T4DNA 连接酶 来源： T4噬菌体作用：既能连接黏性末端 也能连接平末端， 但后者效率低 (2) 实质：恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 以下是两种限制酶切割后形成的 DNA片段 ， 分析回答问题。 ① GC „ ② AA T TC „ ③„ GC ④„ CT T AA CG „ G „ „ CG „ G (1) 其中 ① 和 ________ ____ 是由一种限制酶切割形成的____________ 末端，两者要重 组成一个 DNA 分子，所用 DNA连接酶通常是 ________。 (2) _______ _ 和 ______ __ 是由另一种限制酶切割形成的____________ 末端，两者要形成重组 DNA 片段，所用 D NA 连接酶通常是 ____________。 [解析 ] 分析以上 4个 DNA片段 ， 可清楚分析出 ①③ 为平末端 ， 连接酶应用 T4DNA连接酶； ②④ 为黏性末端且相同 ， 连接时应用 EcoliDNA连接酶。 [答案 ] (1)③ 平 T4DNA连接酶 (2)② ④ 黏性 EcoliDNA连接酶 已知某种限制性内切酶在一线性 DNA分子上有 3个酶切位点 ， 如右图中箭头所指。 如果该线性 DNA分子在 3个酶切位点上都被该酶切断 ， 则会产生 a、 b、 c、 d四种不同长度的 DNA片段。 现有多个上述线性 DNA分子 ， 若在每个 DNA分子上至少有 1个酶切位点被该酶切断 ， 则从理论上讲 ， 经该酶酶切后 ， 这些线性 DNA分子最多能产生长度不同的 DNA片段种类数是 ( ) A． 3 B． 4 C． 9 D． 12 [答案 ] C [解析 ] 每一种限制性内切酶切割 DNA后会留下特征性的黏性末端 ， 同时一次切割后 ， 会把 DNA分割成两个片段 ， 且不同的限制酶切后的片段不一样 ， 如果将题图中的三个切割位点自左至右依次标为甲 、 乙 、 丙 ， 只在甲处切 ， 可产生两个片段 ， 即 a和右边的 b＋ c＋ d段 ， 如果只在乙处切 ， 就有 a＋ b和 c＋ d段 ， 如果只在丙处切 ， 就有 a＋ b＋ c和 d段 ， 在甲 、 乙两处同时切 ， 就有 a、 b和 c＋ d段 ， 在乙 、 丙处同时切 ， 就有 a＋ b和c、 d段 ， 在甲 、 丙两处同时切 ， 就有 a、 b＋ c、 d段三种片段 ，在甲 、 乙 、 丙三处同时切 ， 就有 a、 b、 c、 d四种片段。 所以本题应该选 C。 3． “ 分子运输车 ” ——载体 (1)作用：一是用它作为运载工具 ， 将目的基因转移到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制 (称为克隆 )。 (2)作为载体必须具备的条件： ① 具有一个或多个限制酶切割位点 ， 该切割位点必须位于载体本身必需的基因序列之外。 ② 能够自我复制或整合。