高中生物同步课件:52多聚酶链式反应扩增dna片段2人教版选修1内容摘要:
提供的物质 缓冲液 、 DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种引物,四种脱氧核苷酸,耐热的 DNA聚合酶,同时通过控制温度使 DNA复制在体外反复进行。 PCR技术是 80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、快速、 简便、重复性好、易自动化等突出。 : DNA复制环境的区别 体内 DNA的复制 PCR 模板 (母链 ) 细胞内源 外源加入 引物 引物合成酶 外源加入 原料 :dNTP 细胞内源 外源加入 聚合酶 细胞内源 外源加入 反应环境 细胞内的环境 缓冲液 ⑴ PCR过程需要的引物不是 RNA,而是人工合成的DNA单链,其长度通常为 20- 30个脱氧核苷酸 PCR不同点 ⑵ PCR过程中 DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的 : 广泛应用于遗传病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和 DNA序列测定等。 PCR仪 ㈠ .设备及用具 实质上一台能够 自动调控温度 的仪器。 实验操作 微量离心管 一种薄壁塑料管,总容积为 微量移液器 用于定量转移 PCR配方中的液体,其上的一次性吸液枪头用一次更换一次。 ㈡ .实验操作步骤 按照 PCR反应体系的配方将所需用的试剂摆放在实验桌上。 用微量移液器按照 PCR反应体系配方往微量离心管里面加入各种试剂。 混合后盖严微量离心管口的盖子,用手指轻轻弹击管壁。 ⑴ 过程:将微量离心管放在离心机上 ,离心约 10s。 ⑵ 离心目的:使反应液体集中在离心管底部,提高反应效果。 将离心管放入 PCR仪。高中生物同步课件:52多聚酶链式反应扩增dna片段2人教版选修1
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