20xx人教版高中生物选修3专题2第2节第2课时动物细胞融合与单克隆抗体内容摘要:

3 .单克隆抗体的制备过程如下图: 抗原 ―― →免疫 效应 B淋巴 细胞 骨髓瘤细胞―― →筛选  选择培养基 细胞融合杂交瘤细胞―― →选择特定抗体的细胞群继续培养  体外、体内 提取单克隆抗体 4. 制备过程中需注意的几个问题 (1)首先要注射特定的抗原蛋白免疫小鼠 , 对小鼠免疫的原因: B淋巴细胞要经过免疫过程 , 接触抗原 , 增殖分化为有特异性免疫功能的效应 B细胞 , 才能产生相应的抗体 , 所以 , 与骨髓瘤细胞融合的 B淋巴细胞实际上是效应 B淋巴细胞。 (2)融合后可以得到多种细胞 , 包括未融合的 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞 、 相互融合的 B淋巴细胞 、 相互融合的骨髓瘤细胞 、 各种杂交瘤细胞 , 而所需的细胞是专一抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞。 (3)整个制备过程中要经过两次筛选。 第一次筛选得到杂交瘤细胞 (去掉未杂交的细胞及自身融合的细胞 ), 第二次需先在多孔培养板上培养 , 在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养 , 然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 (4)杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质 , 不仅具有效应 B淋巴细胞产生特异性抗体的能力 , 还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力 , 从而可以克服单纯 B淋巴细胞不能无限增殖的缺点 , 而大量产生单克隆抗体。 5. 应用 (1)诊断疾病:诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。 (2)用于治疗疾病和运载药物:运用药物与单克隆抗体连接在一起制成 “ 生物导弹 ” ; (3)分离和纯化抗原分子。 下图是单克隆抗体制备流程示意图。 (1)________技术是单克隆抗体技术的基础。 (2)在图中 HAT培养基上 , 未融合的 ________和融合的________都会死亡 , 只有融合的杂种细胞才能生长。 动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导手段 , 还可以采用 ________。 (3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比 , 最主要的优越性是________。 (4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速 ________特点 , 又具备淋巴细胞的 ________特点 , 经过选择性培养的杂交瘤细胞 , 还需进行 ________和 ________, 经多次筛选 , 就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养 , 或小鼠腹腔内增殖 , 从 ________或________中 , 就可以提取出大量的单克隆抗体了。 (5)淋巴细胞是由动物体 ________中的 ________细胞分化 、发育而来的。 [解析 ] 解决本题首要要对课本内容熟练掌握 , 命题的主要方式是对课本内容进行挖空 , 所以立足课本是解决这类问题的关键。 细胞融合技术最主要的应用就是制备单克隆抗体 , 动物细胞融合和植物细胞原生质体融合的不同点在于动物细胞融合可以使用灭活的病毒进行诱导。 灭活是指使病毒失去感染能力 , 但是具有诱导细胞融。
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