沪科版生命科学高二上6-3基因工程与转基因生物6内容摘要:
制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后,在连拉酶的作用下连接形成重组 DNA分子。 重组 DNA分子导入受体细胞 导入 扩增 要让目的基因表达,必须将它导入受体细胞并进行扩增。 为获得目的基因的表达产物时,通常以大肠杆菌等无害易得的细菌为受体。 为改进某种生物时,将欲改进的生物细胞为受体。 为使重组的 DNA分子更容易进入受体细胞,通常还要用一些物质对受体细胞进行处理,使受体细胞具有更大的通透性。 筛选含目的基因的受体细胞 前三步的处理十分繁锁,为保证目的基因得到有效利用,通常用大量的受体细胞来接受不多的目的基因。 这样,处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 细菌的检测,将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。 淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。 多细胞生物的检测,将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体,检测这些个体是否摄入目的基因,摄入的基因是否表达(是否表现出相应的性状)。 淘汰无变化的个体,保留有相应变化的个体进一步培养、研究。 例:用棉铃饲喂棉铃虫,如虫吃后不出现中毒症状,说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。 如虫吃后中毒。沪科版生命科学高二上6-3基因工程与转基因生物6
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是否会对生态环境造成不利影响。 转基因生物产品是否会对人类的健康造成损害。 转基因植物 转基因植物 – 水稻 抗细菌病的转基因水稻 不抗细菌病的对照水稻 XA21蛋白起着一种接受器的作用:一部分在外检测信号;一部分跨过细胞膜;一部分在细胞内产生信息 转基因植物 – 棉花 转基因抗虫棉 CK 抗虫 CK 抗虫 • 转基因植物 – 花卉 三色矮牵牛 蓝玫瑰 转 基 因 番 茄 用细菌的基因与番茄的
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骤 基因定位 (确定目的基因在 DNA上的位子) 用限制酶从 DNA分子中切取 mRNA DNA 方法 逆转录酶 ◆ 目的基因与运载体重组 ◆ 筛选含目的基因的受体细胞 用与切取目的基因相同的限制酶将质粒切开,然后在DNA连接酶的作用下,使目的基因与质粒组合,形成重组质粒。 (重组 DNA) ◆ 重组 DNA分子导入受体细胞 ● 质粒 DNA分子上通常有特殊的遗传标记基因
整的 DNA分子。 分子运输车 —— 运载体 将外源基因送入细胞一般利用质粒作为运载体。 质粒进入细胞后,停留在细胞中进行自主复制,或接合到染色体上,随染色体 DNA进行同步复制 二、基因操作的基本步骤 供体生物细胞 取出 DNA 用限制酶剪去多余部分 目的基因 两种方法: ⑴从某种生物体细胞中分离 DNA合成仪 ⑵ 通过化学方法人工合成 逆转录或直接合成的方法将脱氧核苷酸合成 DNA(基因)
A连接酶的作用下,使目的基因与质粒组合,形成重组质粒。 (重组 DNA) ◆ DNA分子导入受体细胞 ● 质粒 DNA分子上通常有特殊的遗传标记基因,所以重组质粒也具有遗传标记基因(如抗生素抗性基因,也可以在质粒上人工重组抗性基因)。 ●受体细胞获得重组质粒的同时也获得了抗性基因,所以受体细胞能在含有抗生素的培养基中生长,未成功导入重组质粒的受体细胞无法在含有抗生素的培养基中生长而死亡。 三