沪科版生命科学高二上6-3基因工程与转基因生物14内容摘要:
人们为了得到其表达产物而把它转入到新的生物体中去的基因。 目的基因 受体细胞 供体细胞 提取 DNA 限制酶 提取质粒 细菌 限制酶 人工合成 目的基因 重组 DNA DNA连接酶 筛选 筛选含目的基因的受体细胞 获取目的基因 目的基因与运载体重组 重组 DNA分子导入受体细胞 抗生素 抗性基因 导入 受体细胞 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果。沪科版生命科学高二上6-3基因工程与转基因生物14
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片段在短时间内成百万倍地扩增。 • 步骤二:目的基因与运载体重组 1)用一定的 限制酶切割质粒 ,使其出现一个切口 ,露出 黏性末端。 2)用 同一种 限制酶 切断目的基因 ,使其产生 相同 的 黏性末端。 3)将切下的目的基因片段 插入质粒 的切口处,再加入适量 DNA连接酶 ,形成了一个 重组 DNA分子 (重组质粒) 目的基因与运载体的结合过程,实际上是不同来源的 基因重组的过程。
A连接酶的作用下,使目的基因与质粒组合,形成重组质粒。 (重组 DNA) ◆ DNA分子导入受体细胞 ● 质粒 DNA分子上通常有特殊的遗传标记基因,所以重组质粒也具有遗传标记基因(如抗生素抗性基因,也可以在质粒上人工重组抗性基因)。 ●受体细胞获得重组质粒的同时也获得了抗性基因,所以受体细胞能在含有抗生素的培养基中生长,未成功导入重组质粒的受体细胞无法在含有抗生素的培养基中生长而死亡。 三
整的 DNA分子。 分子运输车 —— 运载体 将外源基因送入细胞一般利用质粒作为运载体。 质粒进入细胞后,停留在细胞中进行自主复制,或接合到染色体上,随染色体 DNA进行同步复制 二、基因操作的基本步骤 供体生物细胞 取出 DNA 用限制酶剪去多余部分 目的基因 两种方法: ⑴从某种生物体细胞中分离 DNA合成仪 ⑵ 通过化学方法人工合成 逆转录或直接合成的方法将脱氧核苷酸合成 DNA(基因)
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切割质粒 ,使其出现一个切口 ,露出 黏性末端。 2)用 同一种 限制酶 切断目的基因 ,使其产生 相同 的 黏性末端。 3)将切下的目的基因片段 插入质粒 的切口处,再加入适量 DNA连接酶 ,形成了一个 重组 DNA分子 (重组质粒) 目的基因与运载体的结合过程,实际上是不同来源的基因重组的过程。 用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处