MALDI-TOF质谱介绍内容摘要:

MALDI-TOF质谱介绍 质辅助激光解吸 子检测器数据分析质量分析器分离 检测进样系统样品导入质谱谱图 m/S):on 出色性能高灵敏度 高分辨 高精确度 真正多极 析 提供更精确的分子结构信息 更宽的样品适用范围 更简便的样品处理过程生物质谱用于蛋白鉴定的基本原理指纹图谱二级质谱用于多肽测序二级质谱用于蛋白鉴定的方法序列标签质 )+析物 )+ 田中耕一发现使用基质可分析生物大分子 - 蛋白质基质的作用:1. 把极性分子隔离开2. 提供卷流,抛出样品分子3. 提供反应离子337nm)+C+作原理 1/2(= 1/2( 则 m/z)分辩率 400飞行管激光样品靶15碎裂 )常用基质3,5子酸,5桂酸(用性较好 )离子生成时1. 空间位置分散 (激光焦班 100m)2. 时间分散 ( 激光脉冲宽度 3 3. 离子初始速度分散 ( 主要因素 )响分辨率的因素置分散大垂直照射影子短位置分散小空间位置分散构图页窗 0 + u+ V0+um/z 相同 的离子, 初始速度较大者 ,其动能 大于 初始速度较小者。 按照 能量守恒 原理,初始速度较大的离子在反射器中 穿入较深 ,因而 总路程较长。 在理想条件下 (反射器设计及工作条件 ),可使 m/z 相同 而初始速度不同的离子 聚焦于检测器上 (即 m/z 相同的 离子同时到达检测器 ),从而提高了分辨率。 分辨率 虽然得到 提高, 但不同基质引起的 质量数漂移 仍然存在。 外标法不易得到准确质量数调谐入射角达到最佳分辨率偏转电极 般只给出准分子离子峰,缺少结构信息。 可适当加大激光强度,使生成离子具有较高的内能。 处于激发态的离子离开离子源后,在飞行区内分解 (亚稳分解 )为碎片离子。 在适当的反射器工作条件下,可观测这些源后分解的碎片离子。 这些碎片离子可提供结构信息,如氨基酸序列。 这种分析方法称为 析。 后分解,提供结构信息 )单同位素质量、名义(整数)质量、平均质量、准确质量12C 2 义质量 平均质量 准确质量6+6+16 = 58 4+2+32 = 58 8+10 = 58 子式)利血平 (的质子加合阳离子的准确质量: 则 相 对误 差 为 165 , H, O , 质量测定误差 (u) 可能分子式的数目165 0910 35 3 2 102030405060708090100% I n t 200 3400 3600 3800 4000 4200 4400 4600 4800 5000M a s s / C h a r g c 2 1 . 54 0 7 6 . 44 0 3 3 . 54 0 7 8 . 43 9 0 1 . 34 1 2 2 . 53 8 1 3 . 34 2 0 9 . 54 0 3 2 . 43 7 6 9 . 34 1 6 4 . 53 9 4 4 . 33 6 8 1 . 24 2 5 3 . 63 7 6 8 . 24 2 9 8 . 63 7 2 4 . 23 6 3 6 . 23 5 9 3 . 14 4 2 9 . 64 4 2 8 . 63 4 6 0 . 04 5 1 9 . 73 3 7 3 . 04 6 4 9 . 73 2 4 1 . 04 8 7 1 . 84 6 4 8 . 83 0 6 5 . 7n R 提供的结构信息峰间隔为 44 表明:聚合物的重复单元 为(R, R ( a). 30 440 450 460 470 480 490 500mV4141 14 002 19:35 14 002 19:33 C 60, 500 (2)+M+K+M+·66ttentions。
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