（人教版）高二生物选修三教学案 1.2-基因工程的基本操作程序（含答案）

（人教版）高二生物选修三教学案 1.2-基因工程的基本操作程序（含答案）内容摘要：

2、，目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增(约为 2n，n 为扩增循环的次数)。 人工合成法：如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可借助 成仪用化学方法直接人工合成。 二、基因表达载体的构建(阅读 基因表达载体的功能使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2基因表达载体的构成3基因表达载体的构建过程一般用同一种限制酶分别切割载体和目的基因，再用 接酶把两者连接。 三、将目的基因导入受体细胞(阅读 3 )1转化的概念目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2转化的方法(1)导入植物细胞农杆菌转化法：将目的基因导入双子叶植物和祼子植物。 基 8、基因表达载体的构建与转化1基因表达载体的构建步骤(1)一般用同一种限制酶切割目的基因和质粒，使其产生相同的末端。 (2)将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量 接酶，形成一个重组子( 重组质粒 )。 构建过程如图：特别提醒：该过程把三种工具(两种工具酶、一种载体)全用上了，是最核心、最关键的一步，在体外进行。 2将目的基因导入受体细胞的方法比较细胞类型方法 说明 特点农杆菌转化法目的基因插入到 粒的 T过农杆菌进入植物细胞插入到植物细胞中的染色体 目的基因表达经济、有效，适合于双子叶植物和裸子植物基因枪法目的基因包裹在微小的金粒或钨粒表面用基因枪高速射入到受体细胞或组织中目的基因表达成本较 9、高，是单子叶植物中常用的基因转化方植物细胞花粉管通法含目的基因的溶液滴加在柱头上 (或用含目的基因的溶液处理花粉粒)花粉粒吸入目的基因授粉目的基因表达简便、经济，我国科学家独创动物细胞显微注射技术目的基因片段受精卵的核内受精卵经胚胎早期培养一段时间后移植到雌性动物的输卵管或子宫内使其发育成转基因动物最为有效的将目的基因导入动物细胞的方法微生物细胞感受态细胞法处理微生物细胞感受态细胞将基因表达载体在缓冲液中与感受态细胞混合一定温度下促使感受态细胞吸收 子简便、经济、有效归纳提炼1结合教材 料卡分析，用花粉管通道法导入受体细胞的目的基因是否需要和载体结合。 试分析原因。 答案需要。 因为目的基因只有和载 10、体结合成基因表达载体才容易在受体细胞中稳定维持和表达。 2农杆菌转化法利用了农杆菌的什么特性。 答案农杆菌中的 粒上的 转移的 转移至受体细胞，并且整合到受体细胞的染色体。 3为什么动物的体细胞一般不作为受体细胞。 答案动物体细胞全能性受到限制，不能发育为一个新个体。 4为什么微生物细胞适合作为基因工程的受体细胞。 但若通过基因工程生产人的糖蛋白，从细胞器的功能分析是否可用大肠杆菌作为受体细胞呢。 答案微生物细胞具有繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少的优点。 不可以，糖蛋白上的糖链是在内质网和高尔基体上加工完成的，而内质网和高尔基体存在于真核细胞中，大肠杆菌是原核生物，细胞中不含有这两种细胞器。 5用于构建 11、基因表达载体的质粒为什么必须具有启动子和终止子。 启动子和终止子与起始密码和终止密码是一回事吗。 答案导入到受体细胞的目的基因的表达需要调控序列，因此在插入目的基因的部位之前需有启动子，之后需有终止子。 不是一回事，启动子和终止子都在 ，在遗传信息转录时起作用。 启动子是启动转录的开始，终止子是 子上决定转录停止的一段列，其组成单位都是脱氧核苷酸。 而起始密码子和终止密码子都是 三个相邻碱基。 起始密码子决定翻译的开始，终止密码子决定翻译的停止。 2农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下感染植物，因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。 下图为农杆菌转化法的示意图，试回答下列问题：(1)一般情况下农杆 12、菌不能感染的植物是_，利用农杆菌自然条件下感染植物的特点，能实现_。 具体原理是在农杆菌的 粒上存在 T具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞_上的特点，因此只要将携带外源基因的 段插入到_(部位)即可。 (2)根据 T测该 段上可能含有控制_(酶 )合成的基因。 (3)图中 c 过程中，能促进农杆菌向植物细胞转移的物质是_类化合物。 (4)植物基因工程中除了农杆菌转化法之外，还可采取_。 ( 至少写出两种)答案(1)单子叶植物将目的基因导入植物细胞染色体的 段(内部)(2)接酶、限制酶(3)酚(4)基因枪法、花粉管通道法解析(1)一般农杆菌不能感染的植物是单子叶植物，可感染双子叶植物和裸子植物。 利用其 13、感染性，可实现目的基因导入植物 细胞。 真正可 转移至受体 细胞并整合到受体细胞染色体的 的是农杆菌 T此目的基因必须插入到该部位才能成功。 (2)根据T以推 测该 段能控制合成 接酶、限制 酶以实现与双子叶植物细胞染色体 整合。 (3)植物细胞受伤后可产生酚类物质，促 进农杆菌向植物细胞转移。 (4)植物基因工程中除了农杆菌转化法之外，还有基因枪法和花粉管通道法等。 一题多变判断正误：(1)获得上述转基因植物的核心步骤是 a。 ()(2)上题图中过程 b 可以用 处理细菌。 ( )(3)用含有重组 粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，从而把目的基因导入植物细胞，在这个过程中所有细胞都导入了目的基因。 ()(4)农杆菌转化法常用的受体细胞是花粉细胞。 ( )(5)在过程 a 中只需要 接酶的参与。 ()(6)用含有重组 粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，要经过植物组织培养才能获得表现出新性状的植物。 ()(7)因病毒能够侵染正常细胞，有的病毒还能将自己的核酸整合到宿主细胞的染色体上，所以动植物病毒也可作为基因工程的载体。 ()答案(1)(2) (3) (4)(5)(6)(7) 三、目的基因的检测与鉴定1目的基因能否。