(人教版)选修一生物 5.1《DNA的粗提取与鉴定》导学案内容摘要:
2、多数蛋白质不能忍受 6080高温,而 以上才会变性。 洗涤剂能够瓦解 ,但 对 影响。 (二)鉴定在 条件下, 会被染成 色,因此二苯胺可以作为鉴定 试剂。 二、实验设计(一)实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑,但是使用 的生物组织,成功的可能性更大。 (二)破碎细胞,获取含 滤液 动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的 ,同时用玻璃棒 ,过滤后收集滤液即可。 如果实验材料是植物细胞,需要先用 溶解细胞膜。 例如,提取洋葱的 ,在切碎的洋葱中加入一定的 和 ,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。 (三)去除滤液中的杂质 方案一 利用 不同浓度的 液中 的不同,通过 4、。 实例:用鸡血细胞液粗提取 鉴定(苏教版必修 2)步骤 操作 图示1、提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液(已在课前配好)510入到50杯中。 向烧杯中加入 20时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌 5后,用放有纱布的 漏斗将血细胞过滤至1000烧杯中,取其滤液。 2、溶解细胞核内的 40 入到滤液中,并作玻璃棒沿一个方向搅拌 1其混合均匀,这时 溶液中呈溶解状态。 3、析出含粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入 ,同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现。 继续加入蒸馏水,溶液中出现的黏稠物会越来越多。 当黏稠物不再增加时停止加入蒸馏水。 4、滤取含粘稠物用放多层纱布的漏斗,过滤溶液至 1000 5、 烧杯中。 取纱布上的。 5、将 0 杯,向烧杯内注入物质的量浓度为20 钝头镊子将纱布上的黏稠物夹至液中,用玻璃棒沿一个方向不停地搅拌 3黏稠物尽可能多地溶解于溶液中。 6、过滤含氯化钠溶液取一个 100 杯,用放有两层纱布的漏斗过滤以上溶液。 取其滤液(于 中)。 7、提取含杂质较少的入 的、体积分数为50 入时动作要慢) ,并作用玻璃棒沿一个方向搅拌,溶液中会出现含杂质较少的丝状物。 当玻璃棒上出现丝状物缠绕时,继续慢慢搅拌,至不再增加时,用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分。 8、鉴定取两支 20 试管,各加入物质的量浓度为 5丝状物放入其中 一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。 然后 7、重新制备。 2、分析 的杂质本实验提取的 制品有可能仍然含有 、 、 等杂质。 3、不同实验方法的比较对于不同的实验方法,本课题可以采用分组的方法进行研究。 首先选取不同的实验材料,其次同种材料还可以采用不同方法,从多方面比较实验结果,如 、 ,二苯胺显色的 等,看看哪种实验材料、哪种提取方法的效果更好。 五、课题延伸本课题使用的洗涤剂是多组分的混合物,在严格的科学实验中很少使用。 实验室提取高纯度的 ,通常使用 、 或 等化学试剂。 【教材答案】(一)旁栏思考题1为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂。 答:蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种 液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞 ,再加上搅拌的 ,就加速了鸡血 8、细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),从而释放出 加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么。 答:洗涤剂是一些离子去污剂,能 ,有利于 ;食盐的主要成分是 利于。 3如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响。 答:研磨不充分会使细胞核内的 放不完全,提取的 ,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。 4此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分。 答:可能含有 、 和 等杂质。 5为什么反复地溶解与析出 够去除杂质。 答:用高盐浓度的溶液溶解 除去 ;用低盐浓度使 出,能除去。 因此,通过反复溶解与析出 能够除去与 解度不同的多种杂质。 6方案二与方案三的原理有什么不同。 最新海量高中、初中教学资料尽在 10、则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难;第二步是 释放和溶解,这一步是实验成功与否的关键,要 ;第三步是纯化,即根据 、 对 及 的耐受性的不同 等特性,最大限度地将 杂质分开;最后一步是对 行鉴定, 这是对整个实验的结果的检测。 2答:提取蛋白质比提取 难度大。 这是因为,与 比,蛋白质对温度、盐浓度、条件要敏 感得多,很容易 ;并且蛋白质的空间结构 ,理化性质 ,使得蛋白质的提取没有一种统一的方法,只能根据特定蛋白质的特性摸索提取的条件,设计特定的方法。 【知识拓展】1制备鸡血细胞液时,为什么要在新鲜的鸡血中加入柠檬酸钠。 答:制备鸡血细胞液时,要在新鲜的鸡血中加入抗凝剂柠檬酸钠,。 其 11、原理是柠檬酸钠能与血浆中 生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的 大减少,血液便不会凝固。 2鸡血离心或静置沉淀后,为什么要弃出上清液。 答:因为上清液是 ,没有血细胞。 要存在于试管底部的 中,所以提取鸡血中的 ,要除去血液中的上清液。 3盛放鸡血细胞液的容器最好是塑料容器,为什么。 答:鸡血细胞破碎以后释放出的 易被玻璃容器吸附,由于细胞内 含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的 会更少。 因此,实验过程中最好使用 的烧杯和试管,这样可以减少提取过程的 损失。 4为什么析出 要用冷却的酒精。 答:预冷的酒精溶液具有以下优点。 一是抑制核酸水解酶的活性,防止 解;二是降低分子运动,易于形成沉淀析出;三是低温有利于增加 子的柔韧性,减少断裂。(人教版)选修一生物 5.1《DNA的粗提取与鉴定》导学案
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