11dna重组技术的基本工具课件内容摘要:

CCCGGG序列 , 并在 C和 G之间切割形成平末端。 • 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口。 可产生几个黏性末端。 要切两个切口,产生四个黏性末端。 • 如果把两种来源不同的 DNA用同一种限制酶来切割,会怎样呢。 会产生 相同的黏性末端 ,然后让两者的黏性末端 黏合 起来,就可以合成 重组的 DNA分子 了。 目前被较广泛提取使用的目的基因有:苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。 ㈡ 基因操作的基本步骤 1、提取目的基因 ——将 需要的基因从供体生物 的细胞内提取出来。 供体生物细胞 取出 DNA 用限制酶剪去多余部分 目的基因 限制酶 • “分子缝合针” ——DNA连接酶 DNA连接酶可把黏性末端之间的 缝隙“缝合” 起来,是把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的 DNA分子才能形成。 “分子缝合针” ——DNA连接酶  根据酶的来源不同,可以将这些酶分为两类:  从大肠杆菌中分离得到: ,只能将双链 DNA片段互补的粘性末端之间连接。  从 T4噬菌体中分离到: T4连接酶,既可以“缝合”双链 DNA片段互补的粘性末端,又可以“缝合”双链 DNA片段的平末端,但连接平末端之间的效率比较低。 A A T T G C C T T A A G 目的基因与运载体结合 用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末。
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