22土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件刘莎内容摘要:
: 实例:在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时, A同学从对应的 106倍稀释的培养基中筛选出大约 150个菌落,但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约 50个菌落。 分析其原因。 原因: ⑴ 土样不同 , ⑵ 培养基污染或操作失误 (或者是混入了其他的含氮物质 ) 小结:通过这个事例可以看出,实验结果要有说服力,对照的设置是必不可少的。 方案一: 由其他同学用与 A同学相同土样进行实验 方案二: 将 A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染。 结果预测: 如果结果与 A同学一致,则证明 A无误;如果结果不同,则证明 A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。 二 .实验的具体操作 ㈠ .土壤取样 从肥沃、湿润的土壤中取样。 先铲去表层土 3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。 ◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。 ㈡ .制备培养基: 制备以尿素为唯一氮源的 选择培养基。 ◆应在火焰旁称取土壤 10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁进行 ◆ 分离不同的微生物采用不同的稀释度 原因:不同微生物在土壤中含量不同 目的:保证获得菌落数在 30~ 300之间、适于计数的平板 [三 ]样品的稀释 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度。 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量 , 选用的稀释范围相同吗。 原因: 土壤中各类微生物的数量 ( 单位:株 /kg)是不同的。 例如在干旱土壤中的上层样本中:好氧及兼性厌氧细菌数约为 2 185万 , 放线菌数约为 477万 , 霉菌数约为。 结论: 为获得不同类型的微生物 , 就需要按不同的稀释度进行分离 , 同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。 ㈣ .取样涂布 ◆实验时要对培养皿作好标记。 注明培养基类型、培养时间、稀。22土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件刘莎
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