李传海-pcr结果分析及应用教学设计

李传海-pcr结果分析及应用教学设计内容摘要：

遏作用大小不一 ，迁移的速度不同。 问题： DNA 分子越大，在凝胶中泳动速度越快吗。 资料 3：核酸荧光染料可插入到 DNA 分子的双链中。 在紫外光的照射下，插入染料的 DNA 呈绿色荧光。 思考、分析、讨论、回答相关问题， 理解电泳的主要原理。 通过资料提示及问题引导的形式，使学生理解电泳的主要原理。 同时训练学生的语言表达 及逻辑思维能力。 （三）结果分析 课前点样的电泳需要 20分钟才能观察，我们先借用其他班的实验结果了解一下如何分析电泳的图谱。 展示图片： 5 课上环节二： PCR 结果的分析 简介：加样孔在上 ， 扩增的 DNA 片段会从加样孔向远端泳动，形成一个跑道，加样孔下方的条带就是检测产物。 M 表示 marker， 17 表示检测的样本。 M 中是已知大小的不同 DNA 分子。 问题 1： M 中的几个条带与加样孔距离为什么不同。 M 的作用是什么。 教师点拨： M 中的 DNA 分子片段大小不同。 以 M 为参照比对待测样本中 DNA 分子片段的大小。 问题 2： 17 为什么有的有条带，有的没有条带。 教师点拨：男性个体有 Y 染色体上的 SRY基因，女性个体没有 Y 染色体。 根据 PCR 结果可以确定 7 为男性，其余为女性。 问题 3：为什么 7 条带的亮度有差异。 受哪些因素的影响。 教师点拨：产物中 DNA 片段的数目不同，亮度不同， DNA 分子数目越多，条带越亮。 问题 4： 1 号是女性却有扩增条带，原因是什么。 如何验证。 教师点拨： 最有可能是模板污染导致假阳性条带，可以设置 不添加 模板 ，只添加 引物、dNTP 和 Taq DNA 聚合酶 的 一组 实验 作为 阴性对照，排除操作中污染的干扰。 问题 5：哪些因素可能导致 扩增失败。 如何验证。 教师点拨： 没有模板或模板质量差、酶失活、引物、 dNTP 失活都可能导致扩增失败，可以设置 添加 已知正常模板和反应体系 的一组 作为 阳性对照排除这些因素的干扰。 观察 电泳结果，思考、分析、讨论相关的问题， 表达。 解释电泳图谱的检测结果。 通过分析讨论5 个问题，引导学生掌握电泳图谱的分析方法，以及阴性和阳性对 照的设计方法。 强化学生对 PCR 原理的理解。 训练学生的实验探究能力，对实验结果的解释和科学论证能力。