免疫诊断与防治-免疫学检测技术内容摘要:

免疫诊断与防治-免疫学检测技术 免疫学检测技术第一节 体外抗原抗体结合反应的特点及影响因素第二节 检测抗原或抗体的体外试验第三节 免疫细胞功能的检测抗原抗体反应特点抗原抗体反应的特异性抗原抗体反应的可逆性抗原抗体反应的浓度和比例抗原抗体反应的可见性 抗原抗体比例合适出现肉眼可见 凝集物,沉淀物受温度、 解质影响第一节 体外抗原抗体结合反应的特点及影响因素抗原抗体反应的影响因素抗 原 抗 体 复 合 物 的 形 成抗原多于抗体 抗原与抗体数量相当 抗原少于抗体凝集反应( 淀反应 (概念:颗粒性抗原(细菌或细胞等)与相应抗体结合在一定条件下,出现肉眼可见的凝集物。 类型: 直接凝集反应间接凝集反应直接凝集反应 玻片法:定性,已知抗体测未知抗原细菌的鉴定和分型人类 试管法:定量,用已知抗原测未知抗体的量肥达氏试验 集颗粒间接凝集反应可溶性抗原 载体颗粒 免疫微球(致敏载体) 抗体 凝集可溶性抗原先吸附在一与免疫反应无关的颗粒载体上,成为致敏颗粒,再与相应抗体结合,出现的凝集现象 淀反应概念:可溶性抗原与相应抗体结合,在一定条件下形成沉淀物的现象 . 可溶性抗原:血清蛋白、外毒素、组织浸出液、细菌滤液等 1)单向琼脂扩散试验2)双向琼脂扩散试验用于血清中 体 单向琼脂扩散试验双向琼脂扩散试验3. 免疫标记技术 将已知的抗体或抗原标记上 荧光素 、 酶、放射性核素 等示踪物质,通过检测标记物,测定抗体或抗原的方法。 常用标记技术:1)免疫酶测定 (联免疫吸附试验 ()免疫荧光技术 ()放射免疫测定法 ()化学发光物质等酶免疫测定用酶标记抗体进行的抗原抗体反应,通过酶作用于底物后显色来判断结果。 抗原抗体反应酶促反应酶联免疫吸附试验( 已知抗原或抗体吸附在固相载体表面,再用酶标抗体进行检测的抗原抗体反应。 特点:敏感性高( 操作简便类型:直接法 (双抗体夹心法 ): 接法 : 抗 抗体夹心法放射免疫测定法 ( 原理:用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检测的技术 常用放射性核素: 125I、 131I 应用:测定血清、尿液等液体中的微量抗原或半抗原物资,如激素、药物等。 敏感性很高,应用广泛。 免疫细胞功能的检测 免疫细胞的分离 免疫细胞的功能测定一、免疫细胞的分离 外周血单个核细胞( 分离淋巴细胞分离:葡聚糖 淋巴细胞及其亚群的分离和分析流式细胞术抗原肽 细胞检测链霉亲合素 荧光素生物素原肽结合特异性 淋巴细胞转化试验有形态计数法、同位素法三种 细胞毒试验: 51亡细胞检查法等 细胞因子检测: 生物活性测定法等 皮肤试验(体内法): ) 单向琼脂扩散试验等测定 ) 抗体形成细胞测定溶血空斑形成试验第 23章 免疫学防治一、免疫 预防二、免疫 治疗1979年 10月 26日 天花 ” 已绝迹这是医学史上的里程碑人工主动免疫输入 抗原物质 (疫苗,类毒素 ), 主动刺激机体免疫系统产生免疫应答 , 获得特异性免疫力的方法。 作用 : 预防或治疗特点:慢、持久人工被动免疫( 入免疫效应物质( 抗体等 ),使机体 被动 立即 获得短期 特异免疫力的方法。 快、短暂应用:紧急预防或治疗, 抗毒素、 人免疫球蛋白制剂、单克隆抗体主动免疫被动免疫 灭活疫苗 减毒活疫苗 类毒素病原体灭活减毒活病原体细菌外毒素脱毒而得疫苗的基本要求: 安全性;有效性;实用性疫苗种类: 亚单位疫苗:提取病原体有效的免疫原成分制成的疫苗。 霍乱亚单位疫苗 合成肽疫苗:用人工合成多肽抗原连接适当载体与佐剂制成的疫苗。 猪口蹄疫合成肽疫苗 基因工程疫苗:利用 编码病原体免疫原的基因与细菌质粒构建重组体称为 直接免疫机体。 转基因植物疫苗:将编码有效免疫原的基因导入可食用植物细胞的基因组中,免疫原可在植物中稳定的表达和积累,人类和动物通过食入该植物达到免疫接种的目的。 预防性疫苗:按照规定的免疫程序有计划地对人群进行预防接种,提高人群免疫水平,预防传染病。 治疗性疫苗:疫苗应用计划免疫出生1月龄2月龄3月龄4月龄5月龄6月龄8月龄 18月龄18周岁 6周岁乙肝疫苗 卡介苗 脊灰疫苗 百白破 白破疫苗 麻风疫苗 麻腮风 乙脑减毒 甲肝疫苗 第二节 免疫治疗 利用免疫学原理,针对疾病的发生机制,人为地调整机体的免疫功能,以达到治疗目的。 分子疫苗合成肽疫苗、重组载体疫苗、 包括肿瘤抗原和微生物抗原疫苗 抗体免疫血清;单克隆抗体;基因工程抗体 . 细胞因子重组细胞因子;细胞因子拮抗疗法 . 分子治疗抗肿瘤单克隆抗体 细胞疫苗肿瘤细胞疫苗、基因修饰的瘤苗、 过继免疫 干细胞移植分离骨髓、外周血、脐血中的干细胞。 细胞治疗微生物制剂: 卡介苗( 短小棒状杆菌 ;微生物提取物(如 多糖类 )中药制剂: 黄芪、人参、枸杞子等免疫因子: 转移因子 ;免疫核糖核酸 ;胸腺肽 生物应答调节剂与免疫抑制剂 生物应答调节剂: 指具有促进或调节免疫功能低下者的免疫功能的制剂,通常对免疫功能正常者无影响。 免疫抑制剂化学合成药物:1、 烷化剂:环磷酰胺2、 抗代谢药:硫唑嘌呤3、 激素:糖皮质激素真菌代谢产物1、环孢素 A:对 作用强于环孢素 与环孢素 药及其有效成分: 雷公藤多甙思 考 题1、概念:人工主动免疫、人工被动免疫、 免疫标记技术2、常用的人工主动免疫和人工被动免疫的制剂 ?3、间接法 、 何谓 生物应答调节剂。
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