天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术

天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术内容摘要：

天麻蜜环菌、萌发菌母种生产技术 发菌母种生产技术 人工栽培天麻，在有性繁殖过程中，需要萌发菌和蜜环菌两种共生菌。 笔者在生产实践中，摸索出两种共生菌都能生长的培养基及生产技术。 具体做法如下。 1 体培养基马铃薯（挖去芽眼、去皮、切片）100g，硬杂木屑、麦麸、玉米面各 50g，自来水或天然水 1300双重锅内煮沸 30 分钟后用双层纱布过滤。 取滤液补水至 1000葡萄糖 20g、磷酸二氢钾 2g、硫酸镁 1g、10部溶解摇均后，分装于 500三角瓶或罐头瓶内，每瓶装150右，也可装于试管内，装入量为试管容积的 1/4。 三角瓶和试管用棉花塞口，罐头瓶用 2 层牛皮纸或 4 层报纸上盖一层塑料布封口后，用皮筋扎口。 特点：技术含量高，繁殖快，长好即可应用，但不能长期保存。 体斜面培养基是食用菌生产中常用的培养基，按照“操作程序制取滤液，在滤液中加入琼脂 18g，加热溶化并补水至 1000热加入葡萄糖20g、磷酸二氢钾 2g、硫酸镁 1g、蛋白胨 5g、10部溶解摇均，分装于试管内，装量为试管容量的 1/4，然后用棉花塞口。 屑培养基硬杂木屑 50%、玉米芯（粉碎成小颗粒状）25%、麦麸 15%、玉米面 10%，外加葡萄糖 蔗糖 石膏 1%、石灰 磷酸二氢钾 硫酸镁 2%原料和石膏、石灰等干料拌均，再将上述可溶解的所有辅料溶于水中并拌入原料中，使之含水量为 70%，充分拌均后装入试管，并适当压实。 装入量为试管容积的 1/2，然后用棉花塞口。 特点：耐贮藏，便于邮寄。 2 灭菌用手提式高压灭菌锅，也可用民用高压锅代替。 体和斜面固体培养基灭菌时，蒸汽压力为 方厘米时稳定保持 30分钟，待锅内温度降到 5070时出锅。 液体培养基出锅后直接放入接种箱中，待温度降到 25以下时接种；斜面固体培养基需趁液体状态时倾斜成斜面（斜面长度约占试管长的 3/5），待培养基自然凝固后移入接种箱。 屑培养基灭菌时，蒸汽压力在 方厘米时稳定保持 4560 分钟，自然降温后，出锅直接放入接种箱。 注意：灭菌锅应事先加足水，开锅后一定要待内部冷空气排尽后再压阀，达到压力后，调小热源，维持压力。 灭好菌后，降压不能过急，以防冲掉棉塞。 3 接种必须在无菌条件下，严格按照无菌操作要求进行。 种液体培养基只需从母种试管内挑取花生米大小的 12 块母种（带有菌丝的种块）接入三角瓶中。 接入试管液体培养基时，种块可小一些。 种斜面培养基蜜环菌需趁斜面有凝结水时接种，凝结水有利于蜜环菌萌发。 每支试管斜面上接入 13 块母种；接种萌发菌时，需待培养基表面无凝结水时再接种。 每支试管斜面上接入 12 块母种。 屑培养基培养基灭菌后不能存放，需尽快接种。 接种时，要用接菌钩适度推压种块，使其与培养基紧密接触，以利菌种萌发生长，接种后需立放。 4 培养接种后，尽快放入恒温箱或培养室内，在 2224的条件下恒温培养。 体种在培养过程中，从第 2 天开始启动摇床振荡培养；手工操作时，每天需手工摇动 68 次。 如果是试管装，摇动后需斜放，7 天左右即可终止培养（萌发菌比蜜环菌的培养时间要多 23 天），应尽快用于生产。 成熟的培养液应是清澈透明、淡茶色或土黄色。 如果浑浊、液面膜状或呈大量泡沫状即是杂菌污染，应废掉。 面种培养时需平放，48 小时左右可看出菌丝萌动并逐渐向周围辐射延伸。 当 1015 天菌丝贯穿斜面培养基（萌发菌培养时间需长一些）时即可用于生产。 置于 04的冰箱内，蜜环菌可保存 40 天，萌发菌可保存 60 天。 屑种接种后需竖立放置培养，防止种块振动，经 1520 天培养，蜜环菌菌索或萌发菌菌丝贯穿到瓶底时，即可用于生产。 置于 04的冰箱内保存，6 个月质量不变。 经冰箱内久存的木屑菌种用于生产时，为防止接种时感染杂菌，可从试管底部破管取种接种。 专利查询。