香菇原生质体外文翻译--拥有再生能力和交配型稳定性的香菇原生质体的高收益制备(编辑修改稿)内容摘要:
il303waSe,其担孢子只可获得一个交配型的菌落。 本研究选用 Mofi 440担孢子的初步确定为 A1B1(), A1B2(), A2B1()和 A2B2(NO .47)四种交配型的单核菌株做进一步的实验。 因在 A≠B=配对反应中只有极少数锁状联合出现,故而 A因子或 B因子相同的交配反应有待将来使用适当的标准菌株进一步精确测定其交配型。 原生质体的释放 材料的培养:快速生长、均匀一致的幼龄茵丝看来是制备原生质体的最合适材料。 因为香菇菌丝一般生长不快,固而我们在菌丝接种方法和培养基方面进行了卓有成效的改进,即液体培养菌丝、剃刀切碎进而经过尼龙网过滤菌丝的接种方法。 在平菇中,亚硫酸盐娄纸浆废液组分证明能够刺激菌丝生长进而改善了原生质体的产量和再生率。 为了促进生长,本实 验对亚硫酸盐类纸浆废液组分作为香菇培养基的一类掭加剂进行了检验,期望获得与在平菇中相似的促进效果。 结果表明:三种亚硫酸盐娄纸浆废液组分(LS、 LSD、 Sanpearl CP)和木质索, 以 Sanpearl cP作为添加剂时改善香菇菌丝生长的效果最佳。 然而如表 1所示,对于原生质体释放。 Sanpearl cP单独添加效果并不十分显著,而木质素的效果最好。 实验还发现,菌丝由于一些不定物质在表面上的附着而变黑。 因而必须洗涤除去这些物质, 在用其它亚硫酸盐纸浆废液组分作为添加剂时,也同样可见少量褐色物质在菌丝表面的附 着,而 Sanpea rlcP为最少。 因此 % sanpearl cP和 % 木质素混合添加到 MYG培养基中是比较理想的。 在改进的菌丝切割接种方法和添加特殊物质封培养基中的条件下, 稳定而足够量的香菇菌丝在培养 34天时就可以很容易地得到: 5075毫克/ 10毫升培养基/ 100毫升三角瓶。 对于原生质体产生最佳时期为 3—4天菌龄(见表 l, 实验 2) . 酶: 对于多种酶的组台在不同浓度和 pH值的情况下进行了检查。 测试过的酶有:纤维素酶 OnOzuka RS和 R一 10, 纤维素酶 Y—c, MelcelaSe P— l,崩溃酶 (DrlselaSe),Novozyme 23 Zymolyase100, 000,几丁质酶、 一葡萄糖昔醛酸酶、 一乙酰舱壁酶、半纤维素酶、蜗牛酶、果胶酶 Y一 20和崩解酶 MaeerozymeR 10。 在用上述酶做的组合华中农业大学本科毕业论文外文翻译 4 中,以 % 几丁质酶 (Sigma, 4U/ m1)和 2—3 %纤维素酶 Onozuka RS的组合效果最好。 酶反应混合液中的渗透 压稳定剂:在几种测试的渗透压稳定剂中,对于香菇原生质体的释放,甘露醇和硫酸镁是优秀的,并且。 酶液 pH值:在 , 纤维素酶 Onoz~a RS和几丁质酶的最适酶解反应 pH值在。 远低于其它担子菌原生质体制备时常常使用的 pH值: —。 酶解反应的其它条件与前文报导基本一致。 原生质体的再生 菌龄:有一个趋势:菌龄越短,再生率越高。 在 “材料和方法 ”中叙述的培养条件下。香菇原生质体外文翻译--拥有再生能力和交配型稳定性的香菇原生质体的高收益制备(编辑修改稿)
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