壳聚糖-阿拉伯胶复凝聚法制备bsa微胶囊毕业论文(编辑修改稿)内容摘要:
会接 触不利环境从而发生变质,具有很好的保护效果,从而使得芯材能够在不同环静中发生作用 [16]。 截止到目前,还没有见到关于 GACh复凝聚法制得 BSA微胶囊的报道。 所以,本课题选择壳聚糖和阿拉伯胶作为壁材成分 [2], 经过复凝聚工艺制备 BSA微胶囊。 通过分析不同制备条件对微囊的包埋率的影响以选择出最好的制备工艺条件。 本文对敏感类物质 BSA的研究和应用提供了理论基础。 青岛农业大学学士学位论文 壳聚糖 阿拉伯胶复凝聚法制备 BSA 微胶囊 4 2 实验材料与方法 实验试剂 壳聚糖(粘度 500mPa•s)( AR) 潍坊海之源有限公司 阿拉伯胶( AR) 上海国药集团化学试剂有限公司 BSA( AR) 国药集团化学试剂有限公司 盐酸( AR) 莱阳市康德化工有限公司 氢氧化钠( AR) 上海国药试剂有限公司 大豆油 风益贸易私人有限公司 实验仪器 HHS2 数显恒温水浴锅 金坛市医疗仪器厂 903 型双向定时恒温磁力搅拌器 上海沪分析仪器厂有限公司 UV—20xx 紫外分光光度计 上海尤尼柯仪器有限公司 电子天平 上海奥豪斯公司 低速大容量离心机 上海安亭科学仪器厂 DELTA 320 PH 计 上海梅特勒 —托利多公司 数显高速分散均质机 上海标本模型厂 试验方法 BSA微胶囊的制备工艺 由于复凝聚反应主要用于油溶性芯材的包埋,因此在包埋水溶性芯材 BSA 时,需要先将其转化为油包水( W/O)型乳状液,然后再通过乳化反应得到水包油包水( W/O/W)型乳状液,最后,经过复凝聚反应制备 BSA 微胶囊。 本文选用大豆油来制备 W/O 型 BSA 乳状液,然后再以 GA 为乳化剂,制备 W/O/W 型乳状液,最后通过调节乳状液的 pH 值,使 GA 与 Ch 发生复凝聚反应,从而达到 BSA 包埋的目的。 BSA 的包埋流程如图 1 所示。 青岛农业大学学士学位论文 壳聚糖 阿拉伯胶复凝聚法制备 BSA 微胶囊 5 B S A B S A 溶 液大 豆 油乳 化W / O 型 B S A 乳状 液5 % G A乳 化W / O / W 型B S A 乳 状 液1 % C h复 凝 聚 反 应B S A 微 胶 囊 图 1 GACh 复凝聚反应制备 BSA 微胶囊的流程 Figure 1 Flow chart for BSA microcapsule preparation by GACh coacervation 乳状液稳定性测定方法 W/O 型 BSA 乳状液稳定性测定方法 在离心管中加入一定量的 W/O 乳状液, 4000r/min 的转速下,离心 15min,读取顶部析出的油相的体积 [17]。 用以下方程式计算稳定性 : W/O/W 型 BSA 乳状液稳定性测定方法 W/O/W乳状液 的乳层保留率的测定方法与上相同,在条件为 20xxr/min的转速下离心 15min[17]。 相应的计算公式为: W/O 型 BSA乳状液制备 以 1%BSA 为水相,大豆油为油相,将两者以一定体积比混合,在一定水浴温度条件下,高速分散乳化一段时间,形成均匀的乳状液。 BSA 与大豆油比例对 W/O 型 BSA 乳状液稳定性影响 将 1%BSA 溶液与大豆油分别按照 1: 1:、 1: 1:、 1:3 比例混合,在 25186。 C , 10000r/min 条件下高速分散 20min,获得均匀的 W/O 乳状液,采用 方法测其稳定性。 青岛农业大学学士学位论文 壳聚糖 阿拉伯胶复凝聚法制备 BSA 微胶囊 6 乳化转速对 W/O 型 BSA 乳状液稳定性影响 将 1%BSA 溶液与大豆油按照 1: 比例混合,在 25186。 C 条件下,分别以7000r/min、 8000r/min、 9000r/min、 10000r/min、 11000r/min、 120xxr/min、 13000r/min转速高速分散 20min, 获得均匀的 W/O 乳状液,然后采用 方法测其稳定性。 乳化时间对 W/O 型 BSA 乳状液稳定性影响 将 1%BSA 溶液与大豆油按照 1: 比例混合,在 25186。 C , 10000r/min 条件下分别高速分散 10min、 20min、 30min、 40min、 50min,获得均匀的 W/O 乳状液,然后采用 方法测其稳定性。 乳化温度对 W/O 型 BSA 乳状液稳定性影响 将 1%BSA 溶液与大豆油按照 1: 比例混合,分别在 25186。 C 、 35186。 C 、 45186。 C 、55186。 C 、 65186。 C , 10000r/min 条件下高速分散 20min,获得均匀的 W/O 乳状液,然后采用 方法测其稳定性。 W/O/W型乳状液制备 将制备的 W/O 乳状液按一定体积比与 5%GA 溶液混合,乳化一段时间,形成均匀 W/O/W 型 BSA 乳状液。 乳化温度对 W/O/W 型 BSA 乳状液稳定性影响 将 W/O 乳状液与 5%GA 溶液按照 1:4 比例混合,分别在 25186。 C 、 35186。 C 、 45186。 C 、55186。 C 、 65186。 C , 10000r/min 的 条件下,高速分散 20min,获得均匀的 W/O/W 型 BSA乳状液,然后采用 方法测其稳定性。 乳化转速对 W/O/W 型 BSA 乳状液稳定性影响 将 W/O 乳状液与 5%GA 溶液按照 1:4 比例混合,在 25186。 C 的条件下,分别以7000r/min、 8000r/min、 9000r/min、 10000r/min、 11000r/min、 120xxr/min、 13000r/min转速,高速分散 20min,获得均匀的 W/O/W 型 BSA 乳状液,然后采用 方法测其稳定性。 乳化时间对 W/O/W 型 BSA 乳状液稳定性影响 将 W/O 乳状液与 5%GA 溶液按照 1:4 比例混合,在 25186。 C 、 10000r/min 条件下,分别高速分散 10min、 20min、 30min、 40min、 50min、 60min,获得均匀的W/O/W 型 BSA 乳状液,然后采用 方法测其稳定性。 青岛农业大学学士学位论文 壳聚糖 阿拉伯胶复凝聚法制备 BSA 微胶囊 7 W/O 乳状液与 GA 比例对 W/O/W 型 BSA 乳状液稳定性影响 将 W/O 乳状液与 5%GA 溶液分别按照 1: 1: 1: 1: 1: 1:6 比例混合,在 25186。 C , 10000r/min 条件下高速分散 20min, 获得均匀的 W/O/W 型 BSA 乳状液,然后采用 方法测其稳定性。 BSA微胶囊的制备 pH 对 BSA 包埋效果的影响 将浓度为 1%的 Ch 溶液与 W/O/W 型 BSA 乳状液等体积混合,用盐酸和氢氧化钠调节 pH 分别至 、 、 、 、 、 和 ,在 25186。 C、 10000r/min条件下高速分散 20min,然后采用 方法测其包埋率。 搅拌温度对 BSA 包埋效果的影响 将浓度为 1%的 Ch 溶液与 W/O/W 型 BSA 乳状液等体积混合,用盐酸和氢氧化钠调节 pH 到 ,分别在 25186。 C、 35186。 C、 45186。 C、 55186。 C、 65186。 C, 10000r/min 条件下高速分散 20min,然后采用 测其包埋率。 搅拌转速对 BSA 包埋效果的影响 将浓度为 1%的 Ch 溶液与 W/O/W 型 BSA 乳状液等体积混合,用盐酸和氢氧化钠调节 pH 到 , 25186。 C 条件下,分别在 8000r/min、 9000r/min、 10000r/min、11000r/min、 120xxr/min、 13000r/min 转速下高速分散 20min,然后采用 测其包埋率。 搅拌时间对 BSA 包埋效果的影响 将浓度为 1%的 Ch 溶液与 W/O/W 型 BSA 乳状液等体积混合,用盐酸和氢氧化钠调节 pH 到 , 25186。 C、 10000r/min 条件下,分别高速分散 10min、 20min、30min、 40min、 50min、 60min,然后采用 测其包埋率。 BSA测定方法 将 GA/Ch复凝聚反应后的乳状液在 4000r/min, 10min条件下离心。 根据考马斯亮蓝法制出 BSA标准曲线,将离心后上清液的吸光度值带入曲线公式,计算出相应 BSA浓度,进而计算出上清液中的 BSA质量。 根据上清液中 BSA质量和离心液 BSA总质量,按照如下公式计算包埋率 [18]: 青岛农业大学学士学位论文 壳聚糖 阿拉伯胶复凝聚法制备 BSA 微胶囊 8 数据处理 每次单因素实验都测定 3 次,结果用 x 表示,然后运用 SPSS 软件进行显著性分析,当显著水平小于 时,则认为数据间有显著性差异。 青岛农业大学学士学位论文 壳聚糖 阿拉伯胶复凝聚法制备 BSA 微胶囊 9 W/O 型 BSA乳状液稳定性研究 BSA与大豆油比例对 W/O 型 BSA乳状液稳定性影响 BSA 与大豆油比例对 W/O 型 BSA 乳状液稳定性影响如图 2。 edcb a0204060801001 : 1 1 : 1 . 5 1 : 2 1 : 2 . 5 1 : 3B S A / 大豆油( v / v )稳定性(%) 图 2 BSA与大豆油比例对 W/O 型 BSA乳状液稳定性的影响 Effect of BSA to soybean oil ratio on the stability of W/O BSA emulsions 由图 2可知, BSA与大豆油的比例对乳状液稳定性影响较大,随着 BSA与大豆油比例值减小其乳状液稳定性逐渐增加。 在比例为 1: 3时,稳定性最好 , 且与其它比例的乳状液的稳定性均具有显著性差异( P)。 这是由于 当水的质量分数减少时,乳状液滴之间不易相互碰撞而聚集下沉 [19]。 而且实验发现, 当继续增加大豆油体积时,会出现搅拌无法均匀的。壳聚糖-阿拉伯胶复凝聚法制备bsa微胶囊毕业论文(编辑修改稿)
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