反刍动物源性枯草芽孢杆菌的分离与鉴定毕业论文(编辑修改稿)

反刍动物源性枯草芽孢杆菌的分离与鉴定毕业论文(编辑修改稿)内容摘要：

兰氏染色 （ 1000）。 图 23 菌 K 芽孢染色（ 100）。 芽孢 6 甘醇 + 淀粉水解 + 脲酶试验 + 麦芽糖 + 产类淀粉化合物测定 + TSI 试验 A/A +； 蜜二糖 吲哚试验 + 木糖 + 柠檬酸盐试验 注：“ +”表示阳性，“”表示阴性； TSI（三糖 铁培养基）上反应情况： 斜面 /底面 ， A：产酸（黄色）； K：产碱（红色）； +：阳性； ：阴性。 产气； H2S 根据《伯杰细菌鉴定手册》 [14]和《常见细菌鉴定手册》 [15]，上述结果均属于芽孢杆菌属的生化特性，证明分离菌为 芽孢杆菌 属。 图 24 甘醇、葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖发酵试验阳性，蜜二糖发酵试验阴性。 1. 接种菌 K K 对照 2 1 2 1 图 25 山梨醇发酵试验阳性。 1. 接种菌 K K 对照 图 26 木糖发酵试验为阳性。 1. 接种菌 K K 对照 1 2 7 图 27 接种菌 K 的培养基呈红色，MR 试验为阳性。 1. 接种菌 K K 对照 图 28 枯草芽孢杆菌 VP试验为阴性。 1. 接种菌 K K 对照 图 29 在淀粉培养基培养的 菌 K 菌落处滴加革兰氏碘液。 图 210 5min 后，革兰氏碘液消失， 菌 K 淀粉水解试验为阳性。 2 1 2 1 滴加碘液 碘液消失 8 图 211接种菌 K的试管戊醇层呈玫瑰红色，吲哚试验为阳性。 1. 接种菌 K K 对照 图 213 接种菌 K 的西蒙氏培养基仍为草绿色，柠檬酸盐试验为阴性。 1. 接种菌 K K 对照 图 214 接种菌 K 的三 糖铁培养基斜面和底面均为黄色 ，并且产气。 1. 接种菌 K K 对照 图 212 接种菌 K 的培养液滴加碘液后为淡蓝色，产类淀粉化合物测定试验阳性。 1. 接种菌 K K 对照 2 1 1 2 空白对照 2 1 2 1 9 PCR 鉴定结果 对菌 K 进行 16S rDNA 的 PCR 扩增 ，琼脂糖凝胶电泳结果显示 在 1500bp 左右有特异性条带（如图 229）。 图 217 接种菌 K 的尿素酶发酵管呈浅粉红色，脲酶试验 阳性。 1. 接种菌 K K 对照 图 218 接种菌 K 的明胶 20℃时为液体，明胶液化试验为阳性。 1. 接种菌 K K 对照 图 215 菌 K 使过氧化氢分解产生气泡，触媒试验阳性。 1. 接种菌 K K 对照 图 216 KOH 试验阴性。 无拉丝现象， 2 1 2 1 3 2 1 10 M 1 2 注： M： DL Marker 20xx； 1：阳性对照； 2：菌 K 将 分离的菌株 K 的 PCR 产物送北京华大生物公司测序， 测序结果与其他从GenBank 下载的芽孢杆菌属的相关序列进行同源性比较。 结果显示菌株 K 的核酸序列与 Bacillus subtilis strain CICC 10023 ()的同源性最高，达到了 %，因此该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌。 药敏试验结果 对菌 K 进行了药敏试验，得到菌株对 多 种抗生素的药敏结果，如图 219，图220，图 221，图 222，图 223，图 224，图 225， 并判断菌 K 的耐药性，如表22。 图 219 7 对菌 K 有抑制作用， 6 对菌 K 无抑制作用。 图 220 80 对菌 K 有抑制作用， 10对菌 K 无抑制作用。 图 229 菌 K 的 PCR 扩增结果 20xxbp 1000bp 750bp 500bp 250bp 100bp 11 图 221 1 1 1 1 1 1 17 对菌 K 均有抑制作用。 图 222 1 1 2 2 ○ 1 、 ○ 2 对菌 K 均有抑制作用。 图 223 ○ 4 、 ○ 7 、 ○ 8 、 ○ 9 对菌 K 有抑制作用， ○ 3 、 ○ 5 、。