电泳
标准是由油漆制造厂 和 最终用户共同开发和订立的。 目前,对阳离子漆(阴极电泳漆)系统的水纯度标准是 10 微姆欧或 100000 欧姆,欧姆是一个电阻单位,姆欧是导电性的计量单位(姆欧是的简单倒拼)。 如果水质电导率大于 25 微姆欧, 槽液可能被污染。 水质低于 25 微姆欧就不会引起什么问题,但也不会提供系统的水平。 为了防止漆液被污染, 电泳槽中要用去离子水。 无机杂质会引起两个问题:
5 - 6 : 1。 主、副槽均用硬聚氯乙烯塑料制造。 主、副槽间开一长条溢流孔相连。 阳极板为耐酸不锈钢,阳极和阴极(零件)的面积比为 1 : 4 - 5 ,采用离子 交换膜的阳极隔离装置。 连续循环过滤装置要求循环泵 24h 运转,电机温升不超过 60℃ ,使用 5μ m 滤 芯连续过滤,并应经常检查和更换清洗滤芯。 热交换装置最好不要用电加热管直接加温电泳液,以避 免局部过热而使漆膜
;非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。 垂直电泳槽图片 湿转电泳 • 将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,转移至固相膜上 ,再用标记的抗体或二抗与之反应,以显示膜上特定的蛋白条带。 • 整个电泳过程 完全浸在缓冲液中 完成的称为湿转电泳 湿转电泳槽图片 半干转电泳 •
不能很好解决问题的情况,应首要考虑该因素。 + 2. 样品如何处理。 根据样品分离目的不同,主要有三种处理方法:还原 SDS处理、非还原 SDS处理、带有烷基化作用的还原 SDS处理。 1)还原 SDS处理:在上样 buffer中加入 SDS和 DTT(或 Beta巯基乙醇)后,蛋白质构象被解离,电荷被中和,形成 SDS与蛋白相结合的分子,在电泳中,只根据分子量来分离。 一般电泳均按这种方式处理
迁移时间不稳定 出峰时间不稳定且无规律 缓冲溶液与毛细管内壁平衡较慢 每次样品运行之间避免用 NaOH冲洗毛细管 出峰时间依次后延 样品中有物质 易发生吸附 首先在每次样品运行之前用 NaOH短时间冲洗毛细管,看迁移时间能否重复,如果效果不佳请使用涂层毛细管来改善结果或者将样品再次处理,以去除样品中易吸附的组分 6 峰形和出峰时间不稳定 更换缓冲溶液种类 峰形和时间稳定 缓冲溶液不稳定,易电解
• n=(181。 os+181。 ie)EL/2D D↓ D越小 n↑ 如生物大分子 u↑ E↑ n↑ 来自 中国最大的资料库下载 高压电源 电压 530KV 电流 5100μ A 毛细管 φ 25100μ m 长 20100cm 电极槽 玻璃或塑料瓶 电极 1mm铂丝 检测器 UV、 荧光柱上检测 激光诱导荧光检测 微电极电化学检测 CEMS 进样方法 电渗进样 压差法 进样时间 210秒