基因工程
现可利用基因工程方法,将人的 生长激素基因导入大肠杆菌 中,使其生产生长激素。 人们从 450 L大肠杆菌培养液中提取的生长激素,相当于 6万具尸体的全部产量。 • 基因工程药品 —— 生长激素 转基因动物的 乳腺。 • 就基因药物而言,最理想的表达场所是哪里。 是指把人或哺乳动物的某种 基因导入 到哺乳动物 (如鼠、兔、羊和猪 )的 受精卵 里,目的基因若与受精卵染色体 DNA整合
存在的难题: 解决方法: 猪 免疫排斥 将供体基因组导入某种基因调节因子,以 抑制抗原决定基因的表达,或设法除去抗原决定基因, 再结合克隆技术,培育出 没有免疫排斥反应 的转基因克隆猪器官。 (三)、基因工程药品异军突起 工程菌:用基因工程的方法,使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系。 我国已生产的产品 : 白细胞介素 干扰素、乙肝疫苗等 (四)基因诊断与基因治疗 基因诊断:
过程①表示基因表达载体的构建,在该过程中需要用限制酶对载体进行切割以便于目的基因的插入(限制性核酸内切酶,简称限制酶,写其他的不得分);启动子是一段特殊的 DNA序列,是 RNA聚合酶结合和识别的位点, RNA聚合酶结合到该位点,可驱动转录过程。 ( 2)过程②表示动物细胞培养,培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理,使之分散成单个的细胞,之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养。 (
二、基因工程的应用 运用基因工程技术,不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及畜、禽新品种,还可以培养出具有特殊用途的动、植物。 生长快、耐不良环境、肉质好的转基因鱼 (中国 ) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛 (阿根廷 ) 基因工程与作物育种 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯 不会引起过敏的转基因大豆 转基因龙胆花色奇异 转基因蓝猪耳改变花色
The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1978 for the discovery of restriction enzymes and their application to problems of molecular geics 限制性内切酶的发现: (宿主细胞的限制和修饰作用 ) 限制: 细菌的自我保护系统病毒的侵染 修饰:
存竞争性,对自然界生物多样性的影响。 其 中人们最为担心的是转基因食品对人体健康是否安全,转基因食品与常规食品比较有无不安全的成分。 这就需要对其主要营养成分、微量营养成分、抗营养因子的变化、有无毒性物质、有无过敏性蛋白以及转入基因的稳定性和插入突变进行检测。 另外是人们对 .. “基因逃逸”的担心。 所谓 .. “基因逃逸”,就是指微生物之间可以通过转导、转化、接合进行基因转移。
AATTC序列 B 识别特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位点 C 识别黏性末端 D 切割质粒 DNA的标记基因 BC D课前热身 4 在基因操作的基本步骤中第一步是 ( ) A 基因与运载体结合 B 提取目的基因 C 将目的基因导入受体细胞 D 基因表达的检测 5 获取真核生物目的基因常用的方法是 ( ) A 写枪法 B DNA扩增技术 C 人工合成基因的方法 D 用限制性内切酶切割 DNA片段
•基因的剪刀 —— 限制性内切酶 大肠杆菌 ()的一种限制酶能识别 GAATTC序列,并在 G和 A之间切开。 限制酶 基因操作的工具 被限制酶切开的 DNA两条单链的切口,带有几个 伸出的核苷酸 ,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 • 基因的剪刀 —— 限制性内切酶 基因操作的工具 • 基因的剪刀 —— 限制性内切酶 基因操作的工具 CTTCATG
胞 基因组 DNA cDNA文库 基因文库 目的基因的克隆 基因工程的基本操作程序 第一步: 目的基因的获取 如何建立 ? 活动 2 体验基因文库的构建过程 分析基因文库构建过程的图解,思考问题: 什么意思。 怎么做。 温和噬菌体:感染宿主细菌后不引起细菌裂解而与宿主细胞建立共生关系并随细菌繁殖传给细菌后代。 解读 cDNA文库的构建过程 (1)提取某种生物发育某一时期的 mRNA。
或噬菌体),从中便可分离出所需基因的 DNA片段。 建立和使用基因文库是分离高等真核生物基因的有效手段,对于基因定位和基因工程的研究都很有用。 步骤二: 基因表达载体的构建 1)用一定的 限制酶切割质粒 ,使其出现 一个切口 ,露出 黏性末端。 2)用 同一种 限制酶 切断目的基因 ,使其产生 相同 的 黏性末端。 3)将切下的目的基因片段 插入质粒 的切口处,再加入适量 DNA连接酶