pcr

遏作用大小不一 ，迁移的速度不同。 问题： DNA 分子越大，在凝胶中泳动速度越快吗。 资料 3：核酸荧光染料可插入到 DNA 分子的双链中。 在紫外光的照射下，插入染料的 DNA 呈绿色荧光。 思考、分析、讨论、回答相关问题， 理解电泳的主要原理。 通过资料提示及问题引导的形式，使学生理解电泳的主要原理。 同时训练学生的语言表达 及逻辑思维能力。 （三）结果分析 课前点样的电泳需要

（二）电泳相关实验准备 （二）电泳相关实验准备 （二）电泳相关实验准备 琼脂糖凝胶电泳试剂盒 组成成分 分装量 琼脂糖 4 DNA Marker 30μL 50 电泳缓冲液 20mL 核酸荧光染料 80μL 6 Loading Buffer 80μL 离心管 1包（ 25个 /包） （ 1）将 50 电泳缓冲液稀释成 1 电泳缓冲液（即 20mL 50 电泳缓冲液中加入 980mL 蒸馏水

OH OH 脱氧核糖 磷酸基团 碱基 脱氧核糖 碱基 碱基 脱氧核糖 5′ 3 ′ 多脱氧核苷酸链结构简图 O O P O HO 碱基。

ACTTGCATCATCGTATCGTTACATGTAGTAGTCTATCTGCTAACTGTCACTAGAGCTGCTACGTAGTACTGTAGCTAAACTAGCTA PCR Process 1 cycle 2 cycle 3 cycle Process 变性 退火 延伸 加样器的使用 模板的制备 DNA DNA：血细胞、绒毛、尿样、毛发、精斑、口腔上皮细胞 ：脱蜡、蛋白酶 K消化 RNA

3 版 第 2 次修改 主题： 实验室试剂及消耗品管理程序 颁 布 日 期： 2020 年 02 月 28 日 实验室试剂及消耗品管理程序 一、目的： 规范试剂及 消耗品 的管理工作。 二、适用范围： 临床实验室 试的剂及 消耗品。 三、职责： 由 临床基因扩增检验实验室 专业技术人员制定程序文件，实验室负责人审核，科室主任批准实施。 四、 程序 ： 登记 所订购试剂及消耗性材料到货后

铺板 DNA的总量是转化反应所用的量除以稀释倍数。 具体而言转化用 10ng DNA，用 SOC 稀释到 1000u后含 10 ng DNA，用 1/10 铺板，共用 1 ng DNA。 转化率为： 1000 克隆 X10（ 3 次方） ng /铺板 1 ng DNA ug=10（ 6 次方） cfu/ ug 转化 pGEMT 应用 10（ 8 次方） cfu/ ug 感受态细胞

， 31 个循环 , 72℃ 7min。 ■ 电泳 1 电泳缓冲液 : TBE:工作缓冲液 TBE,我的是 10TBE 的浓缩液 , 100ml 的 10TBE 的浓缩液加入 1900 的三蒸水 ,既是为 . 6缓冲液上样缓冲液 (4℃ 保存 ) ■ % / %:琼脂糖凝胶的配制及用法 : 找干净的容积大约为 100ml 的瓶子 ,加琼脂糖 再加 50ml 电泳缓冲液(或 :+100ml

，至少 PCR 操作过程中加样器应该专用，不能交叉使用，尤其是 PCR 产物分析所用加样器不能拿到其它两个区； 8. 重复实验，验证结果，慎下结论。 二． 追踪污染源 如果不慎发生污染情况，应从下面几条出发，逐一分析，排除污染。 （一）设立阴阳性对照：有利于监测反应体系各成分的污染情况。 选择阳性对照时，应选择扩增弱，且重复性好的样品，因强阳性对照可产生大量不必要的扩增序列

，Finpipette可调式移液器； ： ： 仪器设备的使用授权： 仅有本实验室工作人员有权使用实验室的仪器设备； 仪器设备的使用者在使用前首先必须熟悉仪器设备的操作使用程序并经室主任考核认可； PCR实验室现有工作人员均经工程师培训，共同完成实验室检测系统建立，管理文件的撰写工作，考核为非必须； 仪器的使用 ： 仪器设备的使用严格遵守分区使用管理；